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利用改进的最小表达框技术获得抗旱转基因小麦

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 引言第11-25页
   ·小麦基因转化方法第11-13页
     ·花粉管通道法第11页
     ·农杆菌法第11-12页
     ·基因枪法第12-13页
   ·小麦基因枪遗传转化方法改进第13-16页
     ·转基因安全问题迫使转化方法改进第13-14页
     ·传统基因枪遗传转化方法第14-15页
     ·最小表达框基因枪遗传转化方法第15-16页
   ·核基质结合区特性及功能第16-18页
     ·核基质结合区的起源第16页
     ·核基质结合区分子结构特征第16页
     ·核基质结合区功能第16-17页
     ·核基质结合区SAR研究现状第17-18页
   ·加SAR序列改进最小表达框第18-19页
   ·抗逆相关的转录因子研究现状第19-23页
     ·AP2/EREBP类转录因子第19-21页
     ·MYB类转录因子第21-22页
     ·bZIP类转录因子第22页
     ·WRKY类转录因子第22页
     ·NAC类转录因子第22-23页
   ·本研究的意义和技术路线第23-25页
     ·立题意义第23-24页
     ·技术路线第24-25页
2 带SAR序列小麦转化载体构建及功能验证第25-36页
   ·实验材料第25页
     ·植物材料及其生长条件第25页
     ·菌株与载体第25页
     ·酶及其他生化试剂第25页
     ·PCR引物第25页
     ·测序第25页
     ·数据分析第25页
   ·实验方法第25-31页
     ·单酶切体系及方法第25-26页
     ·目的DNA片段胶回收步骤第26页
     ·T4聚合酶补平反应体系及方法第26-27页
     ·T4链接反应体系及方法第27页
     ·大肠杆菌转化步骤及方法第27页
     ·酶切验证第27-28页
     ·基因组DNA获得方法第28-29页
     ·目的DNA片段扩增第29-30页
     ·目的DNA片段与克隆载体连接转化反应第30页
     ·阳性菌液的PCR鉴定步骤及方法第30页
     ·双酶切验证方法第30-31页
     ·报告基因GUS染色方法第31页
   ·实验结果与分析第31-36页
     ·载体构建流程图第31页
     ·SacI酶切位点破坏与验证结果第31-33页
     ·PCR扩增SAR1和SAR2结果第33页
     ·酶切验证pSGUS载体结果第33-36页
3 利用GUS报告基因鉴定带SAR序列小麦转化载体活性第36-41页
   ·转pSGUS基因小麦GUS基因表达功能验证结果第38-39页
   ·T1代转pSGUS基因小麦检测及基因表达功能验证结果第39-40页
     ·PCR检测pSGUS片段全长结果第39页
     ·转pSGUS小麦的胚乳和小花中报告基因GUS染色检测结果第39-40页
   ·讨论与结论第40-41页
4 利用带SAR载体表达抗旱转录因子基因第41-46页
   ·材料方法第41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·pSHGmDREB3载体构建结果第41-42页
     ·pSHGmDREB3转化受体小麦结果第42-43页
     ·pSHGmDREB3转化受体小麦全长及表达检测结果第43-44页
     ·转pSHGmDREB3基因小麦拷贝数确定结果第44-45页
     ·结论与讨论第45-46页
5 转基因小麦株系抗旱性鉴定第46-58页
   ·实验材料第46页
     ·植物村料及其生长条件第46页
     ·生化试剂第46页
   ·实验方法第46页
     ·转基因小麦处理方法第46页
     ·脯氨酸含量测定第46页
     ·POD含量测定第46页
   ·实验结果与分析第46-57页
     ·水旱鉴定转基因小麦抗旱生理指标测定结果第46-52页
     ·旱地测产结果与分析第52-54页
     ·水地鉴定结果与分析第54-57页
   ·结论与讨论第57-58页
6 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-68页
作者简介第68页

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