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铜绿假单胞菌中MuxABC-OpmB调节基因的筛选及研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-9页
表目录第9-10页
图目录第10-12页
缩写比对表第12-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·铜绿假单胞菌及其耐药机制第13-18页
     ·铜绿假单胞菌第13-14页
     ·铜绿假单胞菌耐药机制第14-18页
   ·RND外排泵研究现状第18-19页
   ·MuxABC-OpmB的研究现状第19-20页
   ·细菌群体感应(QS)系统与RND外排泵第20-22页
   ·RsmA与RND外排泵第22页
   ·常见抗生素及作用机理第22-24页
     ·抗生素分类第22-23页
     ·抗生素作用机理第23-24页
   ·研究内容及意义第24-25页
第二章 试验材料和方法第25-43页
   ·试验材料第25-30页
     ·菌株、引物、质粒以及引物第25-26页
     ·培养基的配置第26-28页
     ·实验试剂第28-29页
     ·实验仪器第29-30页
   ·基本试验方法第30-36页
     ·质粒的小量提取第30页
     ·细菌基因组DNA的制备第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31-32页
     ·铜绿假单胞菌感受态细胞的快速制备第32页
     ·聚合酶链式反应反应体系第32页
     ·DNA片段的酶切反应和连接反应第32-33页
     ·转化第33页
     ·三(双)亲株杂交第33-34页
     ·运动性检测第34页
     ·胞外多糖检测第34页
     ·胞外蛋白酶活性检测第34页
     ·生物被膜产量测定第34页
     ·抗生素的敏感性试验第34-35页
     ·CFU法测定抗生素敏感性变化第35页
     ·突变体敏感协同试验第35-36页
   ·MuxABC-OpmB调节基因的筛选及研究第36-43页
     ·MuxABC-OpmB启动子-报道子融合载体的构建第36-37页
     ·MuxABC-OpmB转座突变体库的构建第37-38页
     ·MuxABC-OpmB调节基因的筛选及确定第38-40页
       ·MuxABC-OpmB调节基因的筛选第38页
       ·MuxABC-OpmB调节基因的确定第38-40页
     ·基因PA2581的敲除第40-43页
第三章 实验结果第43-58页
   ·PAO1(ΔMuxABC)耐药机理的探索第43-47页
     ·突变体中青霉素结合蛋白(PBPs)的表达第43-44页
     ·突变体纸片协同实验第44-46页
     ·突变体生物被膜产量的测定第46-47页
   ·MuxABC转座突变体库的构建及筛选第47-50页
     ·载体的构建第47-48页
     ·随机转座突变库的构建、调节基因的筛选及验证第48-49页
     ·突变基因的确定第49-50页
   ·基因PA2581对MuxABC-OpmB的调节作用第50-58页
     ·PA2581基因的互补第50-51页
     ·PA2581的敲除第51-52页
     ·PAO1(Δ2581)与MuxABC的相互关系第52-53页
     ·ΔPA2581的互补第53页
     ·PA2581表型检测第53-58页
       ·运动性检测第53-55页
       ·胞外蛋白酶活性检测结果第55页
       ·胞外多糖检测结果第55页
       ·PA2581抗生素敏感性测定第55-58页
第四章 结论与展望第58-60页
参考文献第60-66页
致谢第66页

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