中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
表目录 | 第9-10页 |
图目录 | 第10-12页 |
缩写比对表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·铜绿假单胞菌及其耐药机制 | 第13-18页 |
·铜绿假单胞菌 | 第13-14页 |
·铜绿假单胞菌耐药机制 | 第14-18页 |
·RND外排泵研究现状 | 第18-19页 |
·MuxABC-OpmB的研究现状 | 第19-20页 |
·细菌群体感应(QS)系统与RND外排泵 | 第20-22页 |
·RsmA与RND外排泵 | 第22页 |
·常见抗生素及作用机理 | 第22-24页 |
·抗生素分类 | 第22-23页 |
·抗生素作用机理 | 第23-24页 |
·研究内容及意义 | 第24-25页 |
第二章 试验材料和方法 | 第25-43页 |
·试验材料 | 第25-30页 |
·菌株、引物、质粒以及引物 | 第25-26页 |
·培养基的配置 | 第26-28页 |
·实验试剂 | 第28-29页 |
·实验仪器 | 第29-30页 |
·基本试验方法 | 第30-36页 |
·质粒的小量提取 | 第30页 |
·细菌基因组DNA的制备 | 第30-31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·铜绿假单胞菌感受态细胞的快速制备 | 第32页 |
·聚合酶链式反应反应体系 | 第32页 |
·DNA片段的酶切反应和连接反应 | 第32-33页 |
·转化 | 第33页 |
·三(双)亲株杂交 | 第33-34页 |
·运动性检测 | 第34页 |
·胞外多糖检测 | 第34页 |
·胞外蛋白酶活性检测 | 第34页 |
·生物被膜产量测定 | 第34页 |
·抗生素的敏感性试验 | 第34-35页 |
·CFU法测定抗生素敏感性变化 | 第35页 |
·突变体敏感协同试验 | 第35-36页 |
·MuxABC-OpmB调节基因的筛选及研究 | 第36-43页 |
·MuxABC-OpmB启动子-报道子融合载体的构建 | 第36-37页 |
·MuxABC-OpmB转座突变体库的构建 | 第37-38页 |
·MuxABC-OpmB调节基因的筛选及确定 | 第38-40页 |
·MuxABC-OpmB调节基因的筛选 | 第38页 |
·MuxABC-OpmB调节基因的确定 | 第38-40页 |
·基因PA2581的敲除 | 第40-43页 |
第三章 实验结果 | 第43-58页 |
·PAO1(ΔMuxABC)耐药机理的探索 | 第43-47页 |
·突变体中青霉素结合蛋白(PBPs)的表达 | 第43-44页 |
·突变体纸片协同实验 | 第44-46页 |
·突变体生物被膜产量的测定 | 第46-47页 |
·MuxABC转座突变体库的构建及筛选 | 第47-50页 |
·载体的构建 | 第47-48页 |
·随机转座突变库的构建、调节基因的筛选及验证 | 第48-49页 |
·突变基因的确定 | 第49-50页 |
·基因PA2581对MuxABC-OpmB的调节作用 | 第50-58页 |
·PA2581基因的互补 | 第50-51页 |
·PA2581的敲除 | 第51-52页 |
·PAO1(Δ2581)与MuxABC的相互关系 | 第52-53页 |
·ΔPA2581的互补 | 第53页 |
·PA2581表型检测 | 第53-58页 |
·运动性检测 | 第53-55页 |
·胞外蛋白酶活性检测结果 | 第55页 |
·胞外多糖检测结果 | 第55页 |
·PA2581抗生素敏感性测定 | 第55-58页 |
第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66页 |