摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
符号及缩略语 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-22页 |
第一章 植物CBL-CIPK信号系统的研究进展 | 第10-22页 |
1 CBL与CIPK基因家族 | 第11-15页 |
·CBL基因家族 | 第11-13页 |
·CIPK基因家族 | 第13-15页 |
2 CBL-CIPK信号网络 | 第15-17页 |
3 逆境胁迫下植物的CBL-CIPK信号网络 | 第17-21页 |
·盐胁迫应答途径 | 第18-19页 |
·低钾胁迫应答途径 | 第19-21页 |
小结 | 第21-22页 |
第二部分 研究报告 | 第22-46页 |
第二章 水稻Ca~(2+)-OsCBL-OsMTN信号系统作用机理初探 | 第22-46页 |
摘要 | 第22-24页 |
1 材料和方法 | 第24-35页 |
·植物材料 | 第24页 |
·质粒和菌株 | 第24-25页 |
·植物材料的处理 | 第25页 |
·PCR引物 | 第25-26页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
·水稻OsMTN基因的克隆 | 第27-28页 |
·序列分析 | 第28页 |
·实时荧光定量PCR分析 | 第28-29页 |
·酵母双杂交实验 | 第29-30页 |
·载体构建 | 第29页 |
·酵母AH109感受态细胞的制备 | 第29页 |
·重组质粒转化酵母 | 第29-30页 |
·双分子荧光互补实验 | 第30-32页 |
·载体构建 | 第30-31页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第31页 |
·农杆菌浸染接种 | 第31-32页 |
·激光共聚焦显微镜观察互作结果 | 第32页 |
·OsMTN及OsCBL2、3、6蛋白的亚细胞定位研究 | 第32页 |
·载体构建 | 第32页 |
·细胞定位研究 | 第32页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第32-35页 |
·载体构建 | 第32-33页 |
·水稻遗传转化 | 第33-35页 |
·愈伤组织的诱导及培养 | 第33页 |
·农杆菌的培养 | 第33页 |
·愈伤组织和农杆菌的共培养 | 第33-34页 |
·抗性愈伤的获得 | 第34页 |
·抗性植株的再生 | 第34页 |
·生根培养 | 第34页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第34页 |
·转基因水稻RT-PCR分析 | 第34-35页 |
2 结果与分析 | 第35-44页 |
·水稻OsMTN基因的克隆与序列分析 | 第35页 |
·水稻OsMTN在逆境胁迫下的表达分析 | 第35-38页 |
·OsMTN与OsCBL的酵母双杂交分析 | 第38-39页 |
·OsMTN与OsCBL的双分子荧光互补分析 | 第39-40页 |
·OsMTN与OsCBL的亚细胞定位 | 第40-41页 |
·OsMTN过量表达载体的构建和转基因研究 | 第41-42页 |
·转基因植株阳性检测 | 第42-43页 |
·转基因水稻植株的RT-PCR检测 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-52页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |