| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·细菌小RNA简介 | 第11页 |
| ·细菌小RNA的发现 | 第11页 |
| ·细菌小RNA的筛选与鉴定 | 第11-14页 |
| ·细菌小RNA的分类 | 第14-16页 |
| ·细菌小RNA的生物学功能 | 第16-18页 |
| ·细菌小RNA在碳源代谢过程中的调控作用 | 第16-17页 |
| ·细菌小RNA在铁代谢平衡过程中的调控作用 | 第17页 |
| ·细菌小RNA在群体感应中的调控作用 | 第17页 |
| ·细菌小RNA在细胞膜应激反应过程中的调控作用 | 第17-18页 |
| ·细菌小RNA在致病过程中的调控作用 | 第18页 |
| ·小RNA的结构分析和靶标预测 | 第18-19页 |
| ·黄单胞菌小RNA研究进展 | 第19-22页 |
| ·黄单胞菌简介 | 第19-21页 |
| ·十字花科黑腐病菌简介 | 第19页 |
| ·十字花科黑腐病菌致病机理 | 第19-21页 |
| ·黄单胞菌中的小RNA | 第21-22页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-41页 |
| ·本研究所用质粒及菌株 | 第23-24页 |
| ·抗生素及其它试剂 | 第24-25页 |
| ·本研究所用引物 | 第25-26页 |
| ·本研究所用培养基及菌种活化、保存 | 第26-29页 |
| ·本研究所用试剂及缓冲溶液 | 第29-31页 |
| ·实验操作方法 | 第31-41页 |
| ·细菌DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·常规PCR扩增反应 | 第33-34页 |
| ·DNA片段的胶回收与纯化 | 第34页 |
| ·DNA的酶切 | 第34-35页 |
| ·DNA的连接 | 第35页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第35页 |
| ·电脉冲转化感受态的制备 | 第35页 |
| ·电脉冲转化 | 第35页 |
| ·三亲接合实验 | 第35-36页 |
| ·突变体构建 | 第36页 |
| ·SDS-酸酚法提取Xcc总RNA | 第36-37页 |
| ·总RNA的DNA消化处理 | 第37页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第37页 |
| ·RT-PCR | 第37-38页 |
| ·表型检测 | 第38-41页 |
| ·营养缺陷型平板检测 | 第38页 |
| ·平板法检测胞外酶 | 第38-39页 |
| ·平板法检测胞外多糖(EPS) | 第39页 |
| ·致病性检测 | 第39页 |
| ·过敏反应(HR)检测 | 第39-40页 |
| ·细胞凝集生长检测 | 第40页 |
| ·游动能力检测 | 第40页 |
| ·金属敏感性及对NaCl、SDS耐受性检测 | 第40-41页 |
| 第三章 结果与分析讨论 | 第41-76页 |
| ·本研究中的小RNA | 第41-42页 |
| ·小RNA缺失突变体的构建 | 第42-48页 |
| ·小RNA过量表达株构建 | 第48-55页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株在基本培养基中的生长情况分析 | 第55-56页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株的胞外酶活性及胞外多糖产量分析 | 第56-58页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株的致病力分析 | 第58-61页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株HR反应分析 | 第61-62页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株聚集生长情况和游动能力分析 | 第62-64页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株对Cd~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Mn~(2+)、Ni~(2+)、Zn~(2+)的耐受力分析 | 第64-70页 |
| ·小RNA缺失突变体及过量表达株对NaCl及SDS的耐受能力分析 | 第70-73页 |
| ·总结 | 第73-74页 |
| ·讨论与分析 | 第74-75页 |
| ·后续工作 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
