摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
英文缩略词表 | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
技术路线 | 第18-20页 |
第一章 日本血吸虫融合蛋白HGPRT·SDISP的构建、表达及鉴定 | 第20-37页 |
·材料 | 第20-22页 |
·质粒、菌株 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·引物 | 第22页 |
·方法 | 第22-27页 |
·pET32a/SjHGPRT·SDISP表达载体的构建 | 第22-24页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第24-25页 |
·编码氨基酸序列的预测 | 第25页 |
·蛋白表达及其条件的优化 | 第25-26页 |
·融合蛋白表达形式的分析 | 第26页 |
·蛋白的纯化及浓度测定 | 第26-27页 |
·Western blot分析 | 第27页 |
·结果 | 第27-34页 |
·SjHGPRT·SDISP的扩增及纯化 | 第27-28页 |
·重组质粒的构建及鉴定 | 第28-30页 |
·氨基酸序列的预测结果 | 第30页 |
·蛋白表达的优化条件及其可溶性表达形式 | 第30-33页 |
·纯化蛋白的浓度 | 第33-34页 |
·western-blot活性鉴定结果 | 第34页 |
·讨论 | 第34-37页 |
·抗原分子的选择 | 第34-35页 |
·蛋白表达载体的选择 | 第35页 |
·大量表达SjHGPRT·SDISP融合蛋白的意义 | 第35-37页 |
第二章 pVAX1/SjHGPRT·SDISP和pVAX1/IL-18联合免疫抗日本血吸虫及肝纤维化的效果 | 第37-53页 |
·材料 | 第37-38页 |
·质粒、菌株 | 第37页 |
·主要实验试剂及设备 | 第37页 |
·实验动物 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·质粒的提取 | 第38页 |
·SjHGPRT·SDISP融合蛋白的大量提取及纯化 | 第38页 |
·Balb/c小鼠免疫保护性的研究 | 第38-42页 |
·统计学处理 | 第42页 |
·结果 | 第42-49页 |
·各实验组的成虫数及减虫率 | 第42页 |
·各实验组的虫卵定量计数结果 | 第42-44页 |
·抗肝纤维化免疫的保护效果 | 第44-46页 |
·各时期特异性IgG抗体水平及其动态变化 | 第46-47页 |
·细胞因子1L-4、1FN-γ水平 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49-53页 |
·IL-18作为佐剂对pVAX1/SjHGPRT·SDISP的免疫增强作用 | 第49-50页 |
·联合免疫对肝纤维化的影响 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
综述 日本血吸虫DNA疫苗联合免疫的研究进展 | 第57-67页 |
参考文献 | 第64-67页 |
附录 | 第67-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位论文期间的工作 | 第72页 |