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非受体酪氨酸激酶c-Abl调节微管组装的机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-10页
缩略词表第10-11页
第1章 引言第11-23页
 1. c-Abl的结构和功能第11-13页
 2. 微管结构和功能第13-15页
 3. PLK1的结构和功能第15-17页
 4. FOXM1的结构和功能第17-21页
   ·FOXM1的结构第17-18页
   ·FOXM1在细胞周期调控中的作用第18-19页
   ·FOXM1调控细胞周期的机制第19-20页
   ·调节FOXM1转录活性的细胞周期信号第20-21页
 5. 本课题研究的科学问题第21-23页
第2章 材料与方法第23-36页
 1. 菌株、细胞株、质粒及基因第23页
 2. 分子生物学工具酶、抗体及主要试剂第23-24页
   ·分子克隆试剂第23页
   ·本实验所用抗体第23-24页
   ·试剂盒第24页
   ·细胞培养试剂第24页
   ·其他试剂第24页
 3. 主要耗材及仪器第24-25页
 4. 引物设计、载体构建及序列测定第25-27页
   ·真核表达载体Flag-CCT3和Flag-CCT5的构建第26页
   ·真核表达载体Flag-FOXM1的构建第26页
   ·真核表达载体Flag-PLK1及其突变体的构建第26-27页
   ·报告基因检测载体的构建第27页
 5. 质粒的小量和中量提取第27-28页
 6. 细胞培养、冻存与转染第28-29页
 7. 免疫沉淀与免疫印迹第29-30页
 8. 蛋白质浓度的测定第30-31页
 9. c-Abl/Arg double knockdown稳定细胞系的建立第31页
 10. 溶解状态微管蛋白的分离第31页
 11. 细胞中总RNA的提取及RT-PCR第31-32页
 12. 荧光实时定量PCR第32-34页
 13. 双荧光素酶报告基因检测第34页
 14. 细胞免疫荧光技术第34-35页
 15. 细胞周期同步化(TdR两步法)第35-36页
第3章 结果第36-52页
 1. c-Abl与PLK1相互作用及对PLK1的磷酸化第36-40页
   ·c-Abl与PLK1的相互作用第36-37页
   ·c-Abl与PLK1的相互作用依赖于细胞周期第37-38页
   ·c-Abl磷酸化PLK1第38-39页
   ·c-Abl对PLK1的磷酸化依赖于细胞周期第39-40页
 2. c-Abl促进FOXM1的表达和蛋白稳定性第40-44页
   ·c-Abl提高FOXM1的蛋白水平第40-41页
   ·c-Abl促进FOXM1的转录第41-43页
   ·c-Abl抑制FOXM1的降解第43-44页
 3. c-Abl促进微管组装第44-49页
   ·c-Abl抑制微管解聚第44-46页
   ·c-Abl促进微管的组装第46-48页
   ·c-Abl不影响CCT的表达和组装第48页
   ·c-Abl抑制微管蛋白的降解第48-49页
 4. c-Abl影响有丝分裂和胞质分裂第49-52页
   ·c-Abl影响纺锤体的组装第49-51页
   ·c-Abl影响胞质分裂第51-52页
第4章 讨论第52-57页
 1. c-Abl对FOXM1的影响第52-53页
 2. c-Abl与PLK1的相互作用及影响第53-54页
 3. c-Abl对微管组装的影响第54-55页
 4. c-Abl对细胞周期的影响第55-57页
第5章 结论第57-58页
 本论文创新之处第57页
 待解决的问题第57-58页
参考文献第58-64页
附录(DNA序列图谱)第64-70页
致谢第70-72页
硕士期间发表论文第72-73页

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