| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·昆虫天然免疫 | 第10页 |
| ·模式识别蛋白 | 第10-17页 |
| ·肽聚糖识别蛋白（PGRPs） | 第11-14页 |
| ·类免疫球蛋白(Immunoglobulin) | 第14-15页 |
| ·β-1，3-葡聚糖结合蛋白(βGBPs) | 第15-16页 |
| ·C 型凝集素结合蛋白（C-type lectins） | 第16-17页 |
| ·Apolipophorin-Ⅲ(ApoLp-Ⅲ)蛋白 | 第17页 |
| ·昆虫病原微生物的免疫逃避 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 Apolipophorin-Ⅲ的原核表达及病原识别功能验证 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒载体 | 第20页 |
| ·供试虫源 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要化学试剂 | 第21页 |
| ·常用的贮存液和缓冲液 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-34页 |
| ·总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·Apolipophrin-Ⅲ的克隆 | 第24-28页 |
| ·引物 | 第24页 |
| ·扩增Apolipophotin-Ⅲ的编码序列 | 第24-25页 |
| ·纯化回收 | 第25页 |
| ·加A 反应 | 第25-26页 |
| ·纯化回收 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·鉴定阳性克隆 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·质粒的提取 | 第28页 |
| ·质粒酶切 | 第28页 |
| ·胶回收 | 第28页 |
| ·表达载体质粒连接 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第29页 |
| ·测序 | 第29页 |
| ·标记基因GFP 重组载体构建 | 第29-30页 |
| ·GFP 编码序列的扩增 | 第29页 |
| ·胶回收 | 第29页 |
| ·质粒提取 | 第29页 |
| ·酶切 | 第29-30页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·转化 | 第30页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·蛋白诱导表达 | 第30-32页 |
| ·诱导的最佳条件选择 | 第30-31页 |
| ·Western blotting | 第31页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第31-32页 |
| ·Apolipophorin-Ⅲ基因组织差异性表达 | 第32页 |
| ·结合试验 | 第32-33页 |
| ·ApoSP22-GFP 诱导产生抗菌肽能力试验 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·RT-PCR | 第34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·诱导表达 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE | 第37-39页 |
| ·Western blotting | 第39页 |
| ·组织差异性表达试验 | 第39-40页 |
| ·去除不同信号肽的ApoLp-Ⅲ-GFP 融合蛋白的结合试验 | 第40-41页 |
| ·ApoSP22-GFP 与不同病原微生物结合情况 | 第41-43页 |
| ·ApoSP22-GFP 诱导产生抗菌肽能力试验 | 第43-44页 |
| ·抑菌圈试验 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
