摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
缩略词对照表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-44页 |
一 两栖类系统生物学 | 第12-13页 |
二 两栖类的皮肤活性物质 | 第13-15页 |
三 抗菌肽和先天免疫 | 第15-29页 |
1、抗菌肽 | 第15-16页 |
2、Cathelicidins | 第16-17页 |
3、防御素 | 第17-18页 |
4、AMPs的表达与调控 | 第18-19页 |
5、AMPs的抗菌活性 | 第19-21页 |
6、AMPs调节的宿主炎症反应 | 第21-23页 |
7、AMPs的趋化活性 | 第23-25页 |
8、依赖于TLR的炎症反应调节 | 第25-26页 |
9、促进伤口愈合 | 第26-27页 |
10、AMPs涉及的疾病 | 第27-28页 |
11、微生物对AMPs的抗性 | 第28-29页 |
四 海蛙的研究概况 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-44页 |
第二章 海蛙皮肤分泌液中抗菌肽的分离纯化与分子克隆 | 第44-72页 |
一 材料与方法 | 第44-50页 |
1、试验材料 | 第44-45页 |
2、样品收集 | 第45页 |
3、抗菌活性检测 | 第45页 |
4、抗菌肽的分离纯化 | 第45-46页 |
5、抗菌肽的结构分析 | 第46页 |
·分子质量测定 | 第46页 |
·氨基酸序列分析 | 第46页 |
6、海蛙皮肤cDNA的合成 | 第46-49页 |
·样品处理 | 第46-47页 |
·皮肤总RNA提取 | 第47页 |
·海蛙皮肤mRNA的纯化 | 第47页 |
·cDNA双链合成 | 第47-49页 |
7、海蛙皮肤cDNA文库的构建 | 第49页 |
8、海蛙皮肤抗菌肽的分子克隆 | 第49-50页 |
9、海蛙抗菌肽cDNA序列的进化遗传数据分析 | 第50页 |
二 结果与讨论 | 第50-68页 |
1、海蛙皮肤抗菌肽的分离纯化 | 第50-51页 |
2、海蛙皮肤抗菌肽的分子质量与一级结构 | 第51页 |
3、海蛙皮肤cDNA文库构建 | 第51-53页 |
4、海蛙皮肤抗菌肽的分子克隆 | 第53-58页 |
5、海蛙皮肤抗菌肽结构分析 | 第58-59页 |
6、海蛙抗菌肽cDNA序列的进化遗传学分析 | 第59-68页 |
·拆分编码海蛙抗菌肽前体的cDNA序列 | 第59-60页 |
·碱基转换与颠换分析 | 第60-63页 |
·同义突变与错义突变分析 | 第63-68页 |
三 小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-72页 |
第三章 海蛙皮肤抗菌肽的生物功能研究 | 第72-88页 |
一 材料与方法 | 第72-77页 |
1、样品合成 | 第72页 |
2、功能研究 | 第72-77页 |
·抗菌活性及最小抑菌浓度(MIC) | 第72-73页 |
·溶血、出血及血浆凝固活性检测 | 第73-74页 |
·肥大细胞脱粒活性 | 第74页 |
·组胺释放活性 | 第74-75页 |
·抗氧化活性 | 第75-76页 |
·红细胞凝集功能 | 第76页 |
·胰蛋白酶水解活性检测 | 第76页 |
·胰蛋白酶抑制剂活性检测 | 第76-77页 |
二 结果与讨论 | 第77-83页 |
1、抗菌活性及最小抑菌浓度(MIC) | 第77-78页 |
2、溶血、出血及血浆凝固活性检测 | 第78-79页 |
3、肥大细胞脱粒及组胺释放 | 第79-81页 |
4、抗氧化活性 | 第81-82页 |
5、红细胞凝集活性 | 第82-83页 |
6、胰蛋白酶水解活性检测 | 第83页 |
7、胰蛋白酶抑制剂活性检测 | 第83页 |
三 小结 | 第83页 |
参考文献 | 第83-88页 |
全文总结 | 第88-90页 |
创新之处 | 第90-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
攻读学位期间发表的论文、发明专利 | 第94-96页 |
附录 | 第96页 |