| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·研究背景 | 第11-12页 |
| ·百合育种目标 | 第12-15页 |
| ·花色 | 第12-13页 |
| ·花期 | 第13页 |
| ·花香 | 第13页 |
| ·抗性 | 第13-14页 |
| ·保鲜及品质改良 | 第14-15页 |
| ·保鲜 | 第14页 |
| ·茎秆挺度 | 第14-15页 |
| ·花粉 | 第15页 |
| ·花型育种研究进展 | 第15-18页 |
| ·研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 东方百合杂种系 AG 基因克隆及序列分析 | 第19-43页 |
| ·材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·质粒及菌株 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·东方百合Lilium hybrid cultivar Constanta AG基因的克隆 | 第20-25页 |
| ·RNA 的提取 | 第20页 |
| ·Constanta AG基因cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
| ·Constanta AG基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的检测与回收纯化 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的连接 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23-24页 |
| ·重组子的鉴定与保存 | 第24-25页 |
| ·重组子的测序 | 第25页 |
| ·东方百合Lilium hybrid cultivar Tiber AG基因的克隆 | 第25页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25页 |
| ·东方百合Lilium hybrid cultivar Siberia AG基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-43页 |
| ·东方百合Lilium hybrid cultivar Constanta AG基因克隆 | 第26-31页 |
| ·东方百合Lilium hybrid cultivar Constanta 总 RNA电泳检测 | 第26页 |
| ·PCR 扩增 Constanta AG 基因 | 第26页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第26-27页 |
| ·序列测定及分析 | 第27-31页 |
| ·东方百合 Lilium hybrid cultivar Tiber AG基因的克隆 | 第31-36页 |
| ·东方百合 Lilium hybrid cultivar Tiber总RNA电泳检测 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增 Tiber AG 基因 | 第32页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第32-33页 |
| ·序列测定及分析 | 第33-36页 |
| ·东方百合 Lilium hybrid cultivar Siberia AG基因的克隆 | 第36-43页 |
| ·东方百合 Lilium hybrid cultivar Siberia总RNA电泳检测26 | 第36-37页 |
| ·PCR 扩增 Tiber AG 基因 | 第37页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·序列测定及分析 | 第38-43页 |
| 3 OT系列百合AG基因克隆及序列分析 | 第43-55页 |
| ·材料与试剂 | 第43页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-55页 |
| ·OT系列百合Lilium hybrid cultivar Conca Dor AG基因克隆 | 第43-49页 |
| ·Lilium hybrid cultivar Conca Dor总RNA电泳检测 | 第43-44页 |
| ·PCR 扩增 Conca Dor AG 基因 | 第44页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第44页 |
| ·序列测定及分析 | 第44-49页 |
| ·OT 系列 Lilium hybrid cultivar Yelloween AG基因的克隆 | 第49-55页 |
| ·Lilium hybrid cultivar Yelloween总RNA电泳检测 | 第49页 |
| ·PCR扩增Yelloween AG基因 | 第49页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第49-50页 |
| ·序列测定及分析 | 第50-55页 |
| 4 亚洲百合杂种系 AG 基因克隆及序列分析 | 第55-66页 |
| ·材料与试剂 | 第55页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-66页 |
| ·亚洲百合Lilium hybrid cultivar Lemon Tree AG基因克隆 | 第55-60页 |
| ·Lilium hybrid cultivar Lemon Tree总RNA电泳检测 | 第55-56页 |
| ·PCR 扩增 Lemon Tree AG 基因 | 第56页 |
| ·重组子菌落 PCR 检测 | 第56页 |
| ·序列测定及分析 | 第56-60页 |
| ·亚洲百合Lilium hybrid cultivar Pisa AG基因的克隆 | 第60-66页 |
| ·Lilium hybrid cultivar Pisa总RNA电泳检测 | 第60-61页 |
| ·PCR扩增Pisa AG基因 | 第61页 |
| ·重组子菌落PCR检测 | 第61-62页 |
| ·序列测定及分析 | 第62-66页 |
| 5 Tiber 和 Siberia AG 基因表达特性研究 | 第66-80页 |
| ·Tiber AG 基因表达特性研究 | 第66-70页 |
| ·Tiber AG 基因表达部位检测 | 第66-67页 |
| ·Tiber 不同部位总 RNA 的提取 | 第66页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第66-67页 |
| ·AG 基因的检测 | 第67页 |
| ·Tiber AG 半定量表达分析 | 第67-70页 |
| ·Tiber 雌蕊、雄蕊不同时期总 RNA 的提取 | 第67页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第67-69页 |
| ·Tiber 内参基因 18S rRNA 循环数的确定 | 第69-70页 |
| ·Tiber AG 基因在各个时期雌蕊中的表达特性 | 第70页 |
| ·Tiber AG 基因在各个时期雄蕊中的表达特性 | 第70页 |
| ·Siberia AG 基因表达特性研究 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-80页 |
| ·Tiber AG 基因表达特性 | 第70-75页 |
| ·Tiber AG 基因表达部位检测 | 第70-72页 |
| ·Tiber AG 基因在雌蕊、雄蕊中的表达分析 | 第72-75页 |
| ·Siberia AG 基因表达特性 | 第75-80页 |
| ·Siberia AG 基因表达部位检测 | 第75-76页 |
| ·Siberia AG 基因在不同时期的雌蕊及雄蕊中的表达特性 | 第76-80页 |
| 6 百合 AG 基因同源性分析 | 第80-89页 |
| ·长片段同源性分析 | 第80-85页 |
| ·长片段进化树分析 | 第80-81页 |
| ·不同品种百合 AG 基因氨基酸序列同源性比较 | 第81-83页 |
| ·百合 AG 基因与近缘物种 AG 基因同源性分析 | 第83-85页 |
| ·长片段系统发育分析 | 第83-85页 |
| ·小片段同源性分析 | 第85-89页 |
| ·小片段进化树分析 | 第85页 |
| ·不同品种百合 AG 基因氨基酸序列同源性比较 | 第85-87页 |
| ·百合 AG 基因与近缘物种 AG 基因同源性分析 | 第87-89页 |
| ·小片段系统发育分析 | 第87-89页 |
| 7 花特异表达启动子 CHSA 驱动的 LtAG1 和 LtAG2 基因反义植物表达载体构建 | 第89-107页 |
| ·基因序列中酶切位点的引入 | 第89-91页 |
| ·引物的设计与合成 | 第89页 |
| ·LtAG1 和 LtAG2 酶切位点的引入 | 第89-90页 |
| ·PCR 产物的检测与回收纯化 | 第90页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第90页 |
| ·连接产物的转化 | 第90页 |
| ·重组子的鉴定与保存 | 第90-91页 |
| ·重组子 PCR 检测 | 第90-91页 |
| ·重组子的保存 | 第91页 |
| ·花特异表达启动子 CHSA 的检测 | 第91-92页 |
| ·CHSA驱动LtAG1和LtAG2基因表达的反义植物表达载体的构建 | 第92-99页 |
| ·构建策略 | 第92页 |
| ·反义植物表达载体的构建 | 第92-99页 |
| ·中间载体pBI121/CHSA的构建 | 第92-95页 |
| ·反义植物表达载体pCLtAG1的构建 | 第95-97页 |
| ·反义植物表达载体pCLtAG2的构建 | 第97-99页 |
| ·结果与分析 | 第99-107页 |
| ·LtAG1 和 LtAG2 酶切位点的引入 | 第99页 |
| ·花特异表达启动子CHSA的检测 | 第99页 |
| ·CHSA驱动的LtAG1和LtAG2反义植物表达载体的构建 | 第99-107页 |
| ·CHSA驱动的LtAG1反义植物表达载体的构建 | 第99-103页 |
| ·反义植物表达载体 pCLtAG2 的构建 | 第103-107页 |
| 8 结论与讨论 | 第107-112页 |
| ·结论 | 第107-108页 |
| ·讨论 | 第108-112页 |
| ·百合AG基因的克隆 | 第108-109页 |
| ·高质量RNA的获得 | 第108页 |
| ·AG 基因的克隆 | 第108-109页 |
| ·已克隆AG基因的结构及序列分析 | 第109页 |
| ·Tiber及Siberia AG基因表达特性研究 | 第109-110页 |
| ·AG 基因系统进化及同源性分析 | 第110页 |
| ·载体构建 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-117页 |
| 附录一：部分实验材料图片展示 | 第117-118页 |
| 附录二：主要缩略词表 | 第118-119页 |
| 附录三：主要溶液配制 | 第119-120页 |
| 附录四：发表文章 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
