拟组织化培养肝细胞用作药物筛选模型的可行性研究
| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1 药物代谢与药物肝毒性 | 第9-17页 |
| ·药物代谢 | 第9-15页 |
| ·Ⅰ相酶 | 第11-14页 |
| ·Ⅱ相酶 | 第14-15页 |
| ·药物肝毒性 | 第15-17页 |
| 2 肝细胞体外培养 | 第17-19页 |
| ·肝细胞单层贴壁培养 | 第17-18页 |
| ·肝细胞凝胶包埋培养 | 第18页 |
| ·肝细胞聚球体形式培养 | 第18-19页 |
| 3 肝细胞的冷冻保存 | 第19-20页 |
| 4 研究思路 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-29页 |
| ·实验材料、试剂及细胞培养基 | 第22-24页 |
| ·主要实验器材 | 第22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22-23页 |
| ·主要实验溶液 | 第23-24页 |
| ·灌注液Ⅰ | 第23页 |
| ·灌注液Ⅱ | 第23页 |
| ·低碳酸盐培养基 | 第23页 |
| ·大鼠肝细胞培养基 | 第23页 |
| ·缓冲液Krebs Henseleit(KHB) | 第23页 |
| ·磷酸缓冲液(PBS) | 第23-24页 |
| ·浓缩培养基 | 第24页 |
| ·原代大鼠肝细胞收获及其培养方法 | 第24-25页 |
| ·原代大鼠肝细胞的收获 | 第24页 |
| ·原代大鼠肝细胞的单层贴壁培养 | 第24页 |
| ·原代大鼠肝细胞的胶原凝胶包埋培养 | 第24-25页 |
| ·人肝细胞的培养 | 第25页 |
| ·大鼠肝细胞冷冻保存和复苏 | 第25-26页 |
| ·肝细胞冷冻保存 | 第25页 |
| ·冻存后细胞复苏 | 第25-26页 |
| ·测定及分析方法 | 第26-29页 |
| ·细胞活率测定(MTT法) | 第26页 |
| ·肝细胞酶活的测定 | 第26-27页 |
| ·肝细胞药物诱导测定 | 第27页 |
| ·肝细胞药物抑制测定 | 第27页 |
| ·胞内GSH及ROS水平测定含量测定 | 第27页 |
| ·尿素和大鼠白蛋白测定 | 第27-28页 |
| ·统计学处理 | 第28-29页 |
| 第三章 代谢酶活的研究 | 第29-42页 |
| ·CYP1A2 | 第29-33页 |
| ·新鲜大鼠肝细胞的CYP1A2的酶活 | 第29-32页 |
| ·CYP1A2的酶活曲线及基因表达 | 第29-30页 |
| ·CYP1A2的诱导与抑制 | 第30-32页 |
| ·冻存后大鼠肝细胞的CYP1A2酶活 | 第32-33页 |
| ·CYP2B | 第33-36页 |
| ·新鲜大鼠肝细胞的CYP2B的酶活 | 第34-35页 |
| ·CYP2B的酶活曲线 | 第34页 |
| ·苯巴比妥对CYP2B的诱导 | 第34-35页 |
| ·冻存后大鼠肝细胞的CYP2B的酶活 | 第35-36页 |
| ·CYP3A | 第36-38页 |
| ·新鲜大鼠肝细胞的CYP3A的酶活 | 第36-37页 |
| ·CYP3A的酶活曲线 | 第36-37页 |
| ·苯巴比妥对CYP3A的诱导 | 第37页 |
| ·冻存后大鼠肝细胞的CYP3A的酶活 | 第37-38页 |
| ·Ⅱ相酶GST | 第38-40页 |
| ·新鲜大鼠肝细胞的GST酶活 | 第38-39页 |
| ·冻存后大鼠肝细胞的GST酶活 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 大鼠肝细胞的他克宁肝毒性研究 | 第42-52页 |
| ·他克宁对细胞活率的影响 | 第42-43页 |
| ·他克宁对细胞GSH及ROS水平的影响 | 第43-45页 |
| ·他克宁对细胞白蛋白和尿素合成的影响 | 第45-46页 |
| ·氟伏沙明对他克宁毒性的抑制 | 第46-47页 |
| ·甘草酸对他克宁的保肝作用 | 第47-50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 人肝细胞的部分代谢酶活及他克宁肝毒性研究 | 第52-57页 |
| ·人肝细胞CYP3A4的酶活研究 | 第52-53页 |
| ·人肝细胞用于他克宁毒性的研究 | 第53-56页 |
| ·他克宁对人肝细胞活率的影响 | 第53-54页 |
| ·他克宁对人肝细胞GSH的影响 | 第54-55页 |
| ·甘草酸对人肝细胞的保肝作用 | 第55-56页 |
| ·小结与讨论 | 第56-57页 |
| 第六章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 硕士期间主要成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
