中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
前言 | 第11-14页 |
材料与方法 | 第14-35页 |
一、材料 | 第14-20页 |
1.北京地区hMPVN和F蛋白编码基因 | 第14页 |
2.菌株 | 第14-15页 |
3.细胞 | 第15页 |
4.质粒 | 第15-16页 |
5.杆状病毒表达试剂盒 | 第16-17页 |
6.其他主要试剂 | 第17-18页 |
7.主要仪器 | 第18页 |
8.PCR扩增引物和测序引物 | 第18-20页 |
二、实验方法 | 第20-35页 |
1.重组质粒的构建 | 第21-24页 |
2.昆虫细胞培养 | 第24-25页 |
3.酵母表达相关实验方法 | 第25-26页 |
4.昆虫杆状病毒表达相关实验方法 | 第26-31页 |
1) Bac-N-blu表达体系 | 第26-29页 |
2) Bac-to-Bac表达体系 | 第29-31页 |
5.IPTG-诱导蛋白在BL21(DE3)E.coli细胞中的表达 | 第31页 |
6.Western blotting检测蛋白的表达水平 | 第31-32页 |
7.His标签蛋白小量纯化方法 | 第32-35页 |
实验结果 | 第35-52页 |
一.在昆虫细胞中进行hMPVN蛋白的表达 | 第35-41页 |
二.重新构建N蛋白重组质粒,并在昆虫细胞中进行表达 | 第41-44页 |
三.hMPVN蛋白在毕赤酵母细胞中的表达 | 第44-47页 |
四.hMPVN蛋在BL21(DE3)细菌中的表达 | 第47-48页 |
五.hMPVF蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第48-52页 |
讨论 | 第52-60页 |
小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
论文综述 | 第65-83页 |
缩略词表 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简历 | 第86页 |