| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一节 实验材料与实验方法 | 第12-30页 |
| 一.病例入选和标本制备 | 第12-13页 |
| 二.实验材料 | 第13-16页 |
| 1.哺乳动物microRNA芯片 | 第13页 |
| 2.主要实验试剂 | 第13-14页 |
| 3.重要实验仪器 | 第14-16页 |
| 三.实验方法 | 第16-30页 |
| (一) MicroRNA检测试验方法 | 第16-21页 |
| 1.组织总RNA提取(Trizol一步法) | 第16-17页 |
| 2.microRNA的分离 | 第17页 |
| 3.microRNA样品的荧光标记 | 第17-19页 |
| 4.杂交与清洗 | 第19页 |
| 5.芯片扫描 | 第19页 |
| 6.数据分析 | 第19-21页 |
| (二) 验证基因芯片结果——Northern blot实验方法 | 第21-25页 |
| (三) 检测组织中相关蛋白表达量实验方法 | 第25-30页 |
| 1.Western blot实验方法 | 第25-27页 |
| 2.反转录PCR(RT-PCR)检测细胞因子表达量实验方法 | 第27-29页 |
| 3.用ELISA方法检测患者血清中VEGF含量 | 第29-30页 |
| 第二节 实验质量控制 | 第30-33页 |
| 一.RNA质量控制 | 第30-31页 |
| 二.micro RNA芯片的质量控制 | 第31-33页 |
| 第三节 实验结果 | 第33-63页 |
| 一.病例入选及样本制备 | 第33-35页 |
| 二.基因芯片实验结果 | 第35-50页 |
| (一) MicroRNA芯片杂交结果扫描图 | 第35-36页 |
| (二) MicroRNA芯片扫描结果 | 第36-45页 |
| (三) 数据分析结果 | 第45-48页 |
| (四) MicroRNA芯片特异性检测 | 第48-49页 |
| (五) MicroRNA芯片灵敏性检测 | 第49页 |
| (六) MicroRNA芯片重复性检测 | 第49-50页 |
| 三.验证基因芯片实验结果(采用northern blot实验方法) | 第50-54页 |
| 四.对表达改变显著的microRNA进行生物信息学分析 | 第54-57页 |
| 五.Western Blot实验结果 | 第57-59页 |
| 六.反转录PCR(RT-PCR)实验结果 | 第59-61页 |
| 七.血清中VEGF检测结果 | 第61-63页 |
| 第四节 讨论 | 第63-68页 |
| 1.关于microRNA芯片的结果 | 第63-65页 |
| 2.针对VEGF的进一步研究结果 | 第65-68页 |
| 第五节 结论 | 第68-69页 |
| 1.通过MicorRNA实验研究,可以得出如下结论 | 第68页 |
| 2.通过检测患者VEGF表达水平,可以得出如下结论 | 第68-69页 |
| 综述1:骨纤维异常增殖症临床研究进展 | 第69-76页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 综述2:miRNA研究进展及其在临床基础研究中的应用 | 第76-89页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
