| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-16页 |
| 文献综述 | 第16-27页 |
| 1 禾谷类作物(水稻)胚乳中淀粉的合成及其调控的研究 | 第16-23页 |
| ·谷类作物胚乳中的淀粉合成酶 | 第16-20页 |
| ·ADP葡萄糖合成酶(ADP-Glucose synthase,AGP) | 第16-17页 |
| ·淀粉合成酶(starch sythase,SS) | 第17-18页 |
| ·淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE or BE) | 第18-19页 |
| ·淀粉脱分支酶(starch debranching enzyme,DBE) | 第19-20页 |
| ·谷类作物胚乳中淀粉合成的调控 | 第20-23页 |
| ·糖对库源器官中碳水化合物质分配的调控 | 第20-21页 |
| ·转录水平的调控 | 第21-22页 |
| ·蛋白水平的调控 | 第22-23页 |
| 2 大麦WRKY转录因子SUSIBA2对淀粉合成的调控机制 | 第23-24页 |
| 3 水稻中WRKY家族转录因子研究状况 | 第24-27页 |
| 第一章 大麦SUSIBA2基因对水稻的遗传转化 | 第27-43页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂及酶 | 第27页 |
| ·用于PCR扩增的引物 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·载体构建 | 第30-33页 |
| ·重组载体对根癌农杆菌的转化 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第34-35页 |
| ·转基因水稻的PCR分子检测 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·表达载体的构建流程 | 第36页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第36-39页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第36-38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·SUSIBA2基因对水稻的转化及PCR鉴定 | 第39-42页 |
| ·转基因水稻中hpf基因的检测 | 第39-40页 |
| ·转基因水稻中目的基因SUSIBA2的检测 | 第40页 |
| ·转基因水稻中Ubi启动子的检测 | 第40-41页 |
| ·转基因水稻中Ubi启动子与正向SUSIBA2之间的相连区域的检测 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第二章 水稻中SUSIBA2相似基因的RNA干扰体系的建立 | 第43-50页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·材料与试剂 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·干扰片断的克隆 | 第44页 |
| ·干扰载体的构建 | 第44-45页 |
| ·转化水稻 | 第45页 |
| ·转基因水稻PCR检测 | 第45页 |
| ·T_0代转基因水稻性状的初步调查 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因组中第三个外显子的克隆 | 第45-46页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因干扰载体的构建与酶切检测 | 第46-47页 |
| ·SUSIBA2相似基因RNAi载体对水稻的转化及转基因苗的初步检测 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 水稻中SUSIBA2相似基因的克隆与表达分析 | 第50-63页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·材料与方法 | 第50-57页 |
| ·植物材料和有关试剂 | 第50-51页 |
| ·克隆水稻SUSIBA2相似基因的引物序列的设计 | 第51页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的克隆 | 第51-54页 |
| ·水稻稻穗中RNA的提取 | 第51-53页 |
| ·RT-PCR扩增cDNA | 第53-54页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的southern印迹分析 | 第54-56页 |
| ·探针的标记 | 第54页 |
| ·水稻DNA提取 | 第54页 |
| ·酶切及电泳 | 第54页 |
| ·转膜 | 第54-55页 |
| ·杂交及检测 | 第55-56页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的Northern分析 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-60页 |
| ·水稻稻穗RNA的提取结果 | 第57页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的RT-PCR结果 | 第57-58页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的cDNA序列 | 第58-60页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的Southern分析 | 第60页 |
| ·水稻SUSIBA2相似基因的表达模式 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| 第四章 水稻中SUSIBA2相似基因的过表达载体的构建 | 第63-73页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·材料与方法 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·主要试剂及酶 | 第63页 |
| ·用于PCR扩增的引物 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·水稻DNA提取 | 第64页 |
| ·PCR反应扩增水稻sbe1启动子 | 第64页 |
| ·表达载体的构建 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-70页 |
| ·水稻sbe1基因启动子的克隆 | 第65-66页 |
| ·水稻sbe1启动子驱动的SUSIRI正义与反义真核表达载体的构建 | 第66-69页 |
| ·构建流程 | 第66-67页 |
| ·sbe1启动子与gus基因重组质粒的PCR筛选及酶切鉴定 | 第67页 |
| ·sbe1启动子与SUSIRI基因重组质粒克隆的PCR筛选及SUSIRI基因插入方向的酶切鉴定 | 第67-69页 |
| ·Ubi驱动的SUSIRI正义表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录:攻读博士学位期间发表和撰写的主要论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
