摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-25页 |
1 PRV的分类地位 | 第9-10页 |
2 PRV粒子形态特征 | 第10页 |
3 PRV的基因组 | 第10-13页 |
4 PRV的糖蛋白 | 第13-18页 |
·必需糖蛋白 | 第13-16页 |
·非必需糖蛋白 | 第16-18页 |
5 PRV的主要毒力基因 | 第18-19页 |
6 病毒的复制 | 第19-23页 |
·吸附和侵入 | 第19-20页 |
·核内转录 | 第20-22页 |
·装配和释放 | 第22-23页 |
7 PRV UL17基因的研究进展 | 第23-24页 |
8 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
第二章 猪伪狂犬病病毒FZ株UL17基因的克隆及序列分析 | 第25-43页 |
1 实验材料 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·细胞、病毒株 | 第25页 |
·基因工程载体、菌株 | 第25页 |
·分子生物学试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-32页 |
·病毒增殖 | 第26页 |
·病毒DNA的提取 | 第26-27页 |
·引物设计 | 第27页 |
·UL17基因的扩增 | 第27-28页 |
·PCR产物的纯化 | 第28页 |
·感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
·pMD-18T Simple Vector与PCR纯化产物的连接 | 第29页 |
·重组质粒的转化 | 第29-30页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第30页 |
·重组质粒的鉴定 | 第30-31页 |
·UL17基因测序及序列分析 | 第31页 |
·UL17基因的生物信息学分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-41页 |
·细胞病变观察 | 第32页 |
·PRV UL17基因扩增 | 第32-33页 |
·重组质粒pT-UL17的PCR鉴定及酶切鉴定 | 第33页 |
·UL17基因的序列测定及分析 | 第33-36页 |
·UL17基因的生物信息学分析 | 第36-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
第三章 猪伪狂犬病病毒FZ株UL17基因原核表达载体的构建 | 第43-48页 |
1 原核表达载体pET-UL17的构建 | 第43-45页 |
·质粒提取 | 第43页 |
·质粒酶切 | 第43-44页 |
·UL17基因和pET-32a(+)的连接 | 第44页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第44页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第44页 |
·碱裂解法制备质粒DNA鉴定连接产物 | 第44页 |
·重组质粒的PCR与酶切鉴定 | 第44页 |
·UL17氨基酸密码子偏爱性初步分析 | 第44-45页 |
2 结果 | 第45-46页 |
·重组质粒pET-UL17的PCR及酶切鉴定 | 第45页 |
·UL17氨基酸密码子偏爱性初步分析 | 第45-46页 |
3 分析与讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55页 |