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牦牛外周血单个核细胞(PBMC)抑制性消减cDNA文库的构建以及重要功能分子的克隆分析

摘要第1-4页
Summary第4-8页
第一章 文献综述第8-19页
 1 mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR)第8-9页
   ·DDRT-PCR 的原理和方法第8-9页
   ·DDRT-PCR 的优点第9页
   ·DDRT-PCR 的缺点第9页
   ·DDRT-PCR 的应用和前景第9页
 2 cDNA 代表性差异分析(cDNA-RDA)第9-10页
   ·cDNA-RDA 的原理和方法第9-10页
   ·cDNA-RDA 的优缺点第10页
   ·cDNA-RDA 的前景第10页
 3 基因表达系列分析(SAGE)第10-11页
   ·SAGE 的原理及流程第10-11页
   ·SAGE 技术的优缺点第11页
 4 抑制性消减杂交技术(SSH)第11-16页
   ·SSH 的原理与方法第11-12页
   ·SSH 的优越性和缺陷第12-15页
   ·SSH 技术的应用进展第15-16页
 5 cDNA 微阵列技术第16-18页
   ·cDNA 微阵列技术的原理与方法第16-17页
   ·cDNA 微阵列技术的优点与局限性第17-18页
 6 结语第18-19页
第二章 牦牛外周血单个核细胞(PBMC)抑制消减文库的构建与鉴定第19-48页
 1 前言第19页
 2 材料和方法第19-33页
   ·材料第19-22页
   ·方法第22-33页
 3 结果第33-41页
   ·牦牛单个核细胞中总RNA 提取、mRNA 纯化及检测第33页
   ·双链cDNA(dscDNA)合成与酶切第33-34页
   ·接头连接效率的检测第34页
   ·消减第二次PCR 产物第34-35页
   ·消减效率检测第35页
   ·消减cDNA 文库的扩增及初步鉴定第35-36页
   ·文库质量鉴定第36-37页
   ·牦牛单个核细胞消减杂交文库差异表达基因生物信息学分析第37-41页
 4 讨论第41-48页
   ·文库构建分析第41-42页
   ·差异基因分析第42-48页
第三章 趋化因子受体4 全长基因的克隆和序列分析第48-59页
 1 前言第48页
 2 材料和方法第48-52页
   ·试验材料第48-49页
   ·方法第49-52页
 3 结果第52-57页
   ·CXCR4 基因 PCR 扩增结果第52页
   ·酶切及 PCR 鉴定第52页
   ·核苷酸序列测定及分析第52-57页
 4 讨论第57-59页
第四章 胸腺素 α 原全长基因的克隆和序列分析第59-67页
 1 前言第59页
 2 试验材料和方法第59-60页
   ·试验材料第59页
   ·方法第59-60页
 3 结果第60-65页
   ·ProTα 基因 PCR 扩增结果第60页
   ·酶切及 PCR 鉴定第60-61页
   ·核苷酸序列测定第61-65页
 4 讨论第65-67页
结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-76页
附录 BLAST 结果(部分)第76-83页
缩略词第83-84页
作者简介第84-85页

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