| 摘要 | 第1-5页 |
| SUMMARY | 第5-11页 |
| 缩略词(ABBREVIATIONS) | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-31页 |
| 1 卵母细胞冷冻保存的意义及发展状况 | 第12-14页 |
| ·卵母细胞冷冻保存的意义 | 第12-13页 |
| ·卵母细胞冷冻保存的发展概况 | 第13-14页 |
| 2 卵母细胞发育与低温冷冻的基本原理 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞的发育 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞低温冷冻原理 | 第15页 |
| 3 卵母细胞在低温冷冻保存过程中受到的损伤 | 第15-17页 |
| ·细胞内冰晶损伤 | 第15-16页 |
| ·细胞外冰晶损伤 | 第16页 |
| ·破裂损伤 | 第16页 |
| ·渗透压损伤 | 第16页 |
| ·冷冻保护剂化学毒性损伤 | 第16-17页 |
| ·低温损伤 | 第17页 |
| ·过冷损伤 | 第17页 |
| 4 冷冻方法 | 第17-20页 |
| ·慢速冷冻法 | 第17页 |
| ·快速冷冻法 | 第17-18页 |
| ·玻璃化法 | 第18-20页 |
| ·塑料微细管法 | 第18页 |
| ·冷环法 | 第18-19页 |
| ·电镜铜网法 | 第19页 |
| ·玻璃微细管法 | 第19页 |
| ·平皿微滴法 | 第19-20页 |
| ·麦管玻璃化法 | 第20页 |
| 5 冷冻保护剂 | 第20-23页 |
| ·冷冻保护剂作用原理 | 第20页 |
| ·渗透性冷冻保护剂 | 第20-21页 |
| ·非渗透性冷冻保护剂 | 第21-22页 |
| ·抗冻蛋白 | 第22页 |
| ·冷冻保护剂的筛选及处理方式 | 第22-23页 |
| ·冷冻保护剂的选择原则 | 第23页 |
| 6 解冻及脱除冷冻保护剂的方法 | 第23-25页 |
| ·解冻 | 第23-24页 |
| ·降温与升温速率 | 第24页 |
| ·除去冷冻保护剂的方法 | 第24-25页 |
| 7 影响卵母细胞冷冻的因素 | 第25-27页 |
| ·卵母细胞的不同发育时期对冷冻效果的影响 | 第25-26页 |
| ·卵母细胞脂肪含量对冷冻效果的影响 | 第26页 |
| ·卵母细胞外围结构对冷冻效果的影响 | 第26页 |
| ·混合保护剂 | 第26页 |
| ·冷冻方法的影响 | 第26-27页 |
| ·生物活性物质 | 第27页 |
| 8 胚胎冷冻保存方法的研究进展及影响其保存的因素 | 第27-31页 |
| ·胚胎冷冻保存方法的研究进展 | 第27-29页 |
| ·冷冻保护剂的影响 | 第29-31页 |
| 第二章 奶牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法研究 | 第31-46页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·试验材料 | 第31-33页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第31-32页 |
| ·开放式细管的制作 | 第32页 |
| ·冷冻液及解冻液的制备 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·卵母细胞的获得 | 第33页 |
| ·卵母细胞的筛选 | 第33-34页 |
| ·卵母细胞的成熟 | 第34页 |
| ·冷冻方法 | 第34页 |
| ·解冻方法 | 第34-35页 |
| ·体外受精 | 第35页 |
| ·卵母细胞染色法评定 | 第35页 |
| ·冷冻效果的评价 | 第35-36页 |
| ·试验设计 | 第36-37页 |
| ·不同基础液的牛GV 期卵母细胞玻璃化冷冻 | 第36页 |
| ·不同发育阶段的牛卵母细胞玻璃化冷冻 | 第36页 |
| ·不同颗粒细胞层数的牛卵母细胞玻璃化冷冻 | 第36页 |
| ·不同的冷冻溶液对OPS 法冷冻牛GV 期卵母细胞 | 第36-37页 |
| ·不同的冷冻溶液对GMP 法冷冻牛GV 期卵母细胞 | 第37页 |
| ·不同承载载体对牛卵母细胞的玻璃化冷冻 | 第37页 |
| ·不同程序解冻玻璃化冷冻的牛卵母细胞 | 第37页 |
| ·统计分析 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| ·不同基础液对牛GV 期卵母细胞玻璃化冷冻效果 | 第37-38页 |
| ·牛GV 期、MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻后发育效果 | 第38页 |
| ·不同颗粒细胞层数的牛卵母细胞玻璃化冷冻效果 | 第38-39页 |
| ·不同的冷冻溶液对OPS 法冷冻牛GV 期卵母细胞效果 | 第39页 |
| ·不同的冷冻溶液对GMP 法冷冻牛GV 期卵母细胞效果 | 第39-40页 |
| ·不同承载载体冷冻牛GV 期卵母细胞效果 | 第40页 |
| ·不同解冻程序对冻后的牛卵母细胞发育效果 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-46页 |
| ·不同基础液的牛GV 期卵母细胞玻璃化冷冻效果 | 第41页 |
| ·不同发育阶段牛卵母细胞玻璃化冷冻效果 | 第41-42页 |
| ·牛卵母细胞所带颗粒细胞多少的玻璃化冷冻效果 | 第42-43页 |
| ·不同的冷冻溶液对OPS 法冷冻牛GV 期卵母细胞体外发育的影响 | 第43页 |
| ·不同的冷冻溶液对GMP 法冷冻牛GV 期卵母细胞体外发育的影响 | 第43页 |
| ·OPS 法和GMP 法对牛GV 期卵母细胞体外发育的影响 | 第43-44页 |
| ·解冻程序对冷冻的牛卵母细胞发育的影响 | 第44-46页 |
| 第三章 奶牛胚胎程序化法冷冻-解冻移植试验 | 第46-50页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·供体牛和胚胎来源 | 第46-47页 |
| ·供体牛来源与选择 | 第46页 |
| ·主要药品及仪器 | 第46页 |
| ·超排方法及胚胎的收集 | 第46-47页 |
| ·冷冻液配置 | 第47页 |
| ·三步法和一步细管法制作及冷冻 | 第47-48页 |
| ·制作 | 第47页 |
| ·胚胎的冷冻保存 | 第47-48页 |
| ·受体牛的选择 | 第48页 |
| ·解冻胚胎的鉴定 | 第48页 |
| ·解冻移植 | 第48页 |
| ·统计分析 | 第48页 |
| 2. 结果 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| ·抗冻剂和脱毒剂的选择 | 第49页 |
| ·一步细管法和三步法冷冻胚胎移植效果 | 第49-50页 |
| 第四章 总结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附图 | 第61-63页 |
| 导师简介 | 第63-64页 |
