| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACTS | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-60页 |
| ·植物叶片衰老机理研究进展 | 第12-23页 |
| ·叶片衰老的特点 | 第13-14页 |
| ·叶片衰老包含PCD的过程 | 第13页 |
| ·叶片衰老不同于普通PCD过程 | 第13-14页 |
| ·衰老相关基因 | 第14-18页 |
| ·衰老相关基因的类型 | 第14-15页 |
| ·一类特殊的衰老相关基因-半胱氨酸蛋白酶基因 | 第15-17页 |
| ·水稻中克隆的衰老相关基因 | 第17-18页 |
| ·引起植物叶片衰老的原因 | 第18-21页 |
| ·内部因素调节植物叶片的衰老 | 第18-20页 |
| ·外部因素调节植物叶片的衰老 | 第20-21页 |
| ·植物叶片衰老的分子机制 | 第21-23页 |
| ·抗衰老工程研究进展 | 第23-28页 |
| ·研究抗衰老作物的意义 | 第23-24页 |
| ·抗衰老工程的发展历史 | 第24-28页 |
| ·植物启动子结构与功能研究 | 第28-44页 |
| ·启动子结构与特征 | 第28-30页 |
| ·结构与特征简介 | 第28-29页 |
| ·植物启动子的保守元件 | 第29-30页 |
| ·植物启动子特异元件 | 第30页 |
| ·植物基因工程中的常用启动子 | 第30-38页 |
| ·组成型启动子 | 第31-32页 |
| ·特异性启动子 | 第32-38页 |
| ·启动子分离的技术方法 | 第38-41页 |
| ·启动子预测 | 第38-39页 |
| ·PCR的方法克隆启动子 | 第39-40页 |
| ·启动子陷阱 | 第40页 |
| ·聚合酶保护法 | 第40-41页 |
| ·启动子功能检测 | 第41-42页 |
| ·启动子强弱的定性定量分析 | 第41页 |
| ·缺失分析 | 第41-42页 |
| ·鉴定启动子DNA上反式作用蛋白结合位点的方法 | 第42-44页 |
| ·酵母单杂交技术 | 第42-43页 |
| ·凝胶阻滞实验(gel retardation assay) | 第43页 |
| ·DNase I足迹实验 | 第43-44页 |
| ·其他鉴定方法 | 第44页 |
| ·常见功能基因组研究方法 | 第44-55页 |
| ·基因表达谱分析技术 | 第45-50页 |
| ·微阵列技术(microarray) | 第45-46页 |
| ·基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE) | 第46-47页 |
| ·cDNA-AFLP | 第47-48页 |
| ·差异展示PCR(Differential Display Reverse Transcription PCR,DDRT-PCR) | 第48页 |
| ·抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH) | 第48-50页 |
| ·基因功能丧失方法(Loss of function) | 第50-52页 |
| ·物理化学诱变 | 第50页 |
| ·反义抑制(antisense suppression)、共抑制(cosuppression)和双链RNA干扰(double-stranded RNA interference,dsRNAi) | 第50-51页 |
| ·插入突变 | 第51-52页 |
| ·基因功能增加方法 | 第52-55页 |
| ·基因超量表达(Over-expression) | 第53页 |
| ·诱导表达(Inducible expression) | 第53-54页 |
| ·基因异位表达 | 第54-55页 |
| ·植物遗传转化方法及特点 | 第55-58页 |
| ·基因枪介导的遗传转化 | 第56页 |
| ·PEG介导的遗传转化 | 第56-57页 |
| ·花粉管通道法 | 第57页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第57-58页 |
| ·研究的目的和意义 | 第58-60页 |
| 2 水稻叶片衰老特异性启动子的克隆和利用 | 第60-90页 |
| ·前言 | 第60页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·受体植物材料 | 第60页 |
| ·菌株、质粒、及外源片段 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-69页 |
| ·启动子序列分析 | 第61页 |
| ·启动子全长和缺失片段的获得 | 第61-63页 |
| ·IPT植物表达载体的构建 | 第63页 |
| ·农杆菌介导的的遗传转化 | 第63页 |
| ·DNA的抽提及Southern杂交 | 第63-64页 |
| ·转基因纯合阳性和阴性株系的筛选 | 第64-65页 |
| ·总RNA的抽提及操作 | 第65页 |
| ·启动子的瞬时表达系统 | 第65-66页 |
| ·GUS的定量及定性分析 | 第66页 |
| ·激素处理 | 第66页 |
| ·启动子片段凝胶阻滞分析(EMSA) | 第66-67页 |
| ·核蛋白的抽提 | 第66-67页 |
| ·凝胶阻滞(gel retardation assay) | 第67页 |
| ·氮含量的分析 | 第67-68页 |
| ·可溶性糖含量的分析 | 第68页 |
| ·纯合转基因株系持绿性的田间调查及农艺性状的考察 | 第68-69页 |
| ·田间试验设计 | 第68页 |
| ·农艺性状的考察 | 第68-69页 |
| ·持绿相关性状考查分析方法 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-83页 |
| ·P_(SAG39)启动子序列分析 | 第69-70页 |
| ·全长启动子的表达模式 | 第70-71页 |
| ·缺失启动子的表达模式 | 第71-73页 |
| ·鉴定P_(SAG39)启动子上衰老相关的顺式作用位点 | 第73-74页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株纯合家系的筛选 | 第74-76页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的持绿性共分离检测 | 第76-77页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的幼苗生长情况 | 第77-78页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的随机区组试验 | 第78-83页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的抽穗期变化 | 第78-80页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的碳氮代谢发生变化 | 第80-82页 |
| ·P_(SAG39):IPT转化植株的农艺性状调查 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-90页 |
| ·P_(SAG39)是衰老特异性表达启动子同时具有胚乳特异不表达的特点 | 第83-85页 |
| ·启动子P_(SAG39)的应用 | 第85-87页 |
| ·P_(SAG39)启动IPT的表达量比GUS低很多 | 第87页 |
| ·抗衰老水稻工程研究前景展望 | 第87-88页 |
| ·实验过程中的一点体会 | 第88-90页 |
| 3 水稻剑叶早期衰老上升表达基因的鉴定 | 第90-116页 |
| ·前言 | 第90-91页 |
| ·材料与方法 | 第91-93页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·总RNA抽提和mRNA分离 | 第91页 |
| ·PCR-select cDNA差减文库的构建 | 第91-92页 |
| ·Macroarray筛选差异表达基因 | 第92页 |
| ·序列分析 | 第92页 |
| ·Northern杂交分析 | 第92页 |
| ·Quantitative reverse transcription(qRT)-PCR和RT-PCR分析 | 第92-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-109页 |
| ·RNA含量和质量的检测 | 第93-94页 |
| ·接头连接效率的检测 | 第94页 |
| ·文库插入片段的检测 | 第94-95页 |
| ·消减效率的检测 | 第95-96页 |
| ·差异表达基因筛选 | 第96-97页 |
| ·剑叶衰老早期上升表达克隆的序列分析 | 第97-103页 |
| ·高丰度的叶片早期衰老基因 | 第103-105页 |
| ·SSH文库基因与持绿性QTLs的共线性 | 第105-108页 |
| ·几个未知功能的基因对激素有响应 | 第108-109页 |
| ·讨论 | 第109-116页 |
| ·行使几类主要功能的基因 | 第109-113页 |
| ·大分子物质代谢 | 第109-110页 |
| ·调控蛋白质合成 | 第110-111页 |
| ·花发育 | 第111页 |
| ·调节基因 | 第111页 |
| ·能量代谢 | 第111-112页 |
| ·病原与逆境 | 第112-113页 |
| ·解毒 | 第113页 |
| ·与持绿性QTLs共线性的基因 | 第113-114页 |
| ·未知功能的基因与激素途径的关系 | 第114页 |
| ·与拟南芥衰老文库的比较 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 附录1 | 第135-148页 |
| 附录2 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
