| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-47页 |
| ·弓形虫与弓形虫病的发现及其危害 | 第14-17页 |
| ·弓形虫与弓形虫病的发现 | 第14-15页 |
| ·弓形虫病的危害 | 第15-16页 |
| ·猪弓形虫病与公共卫生的关系 | 第16-17页 |
| ·弓形虫的病原学 | 第17-24页 |
| ·弓形虫分类 | 第17页 |
| ·弓形虫的各期形态结构 | 第17-19页 |
| ·弓形虫生活史 | 第19-20页 |
| ·流行病学 | 第20-21页 |
| ·致病机制 | 第21-23页 |
| ·抵抗力 | 第23-24页 |
| ·弓形虫的主要基因与蛋白质 | 第24-28页 |
| ·弓形虫表面抗原 | 第24-25页 |
| ·弓形虫棒状体蛋白 | 第25页 |
| ·弓形虫微线体蛋白 | 第25-26页 |
| ·弓形虫致密颗粒蛋白 | 第26-28页 |
| ·弓形虫病的免疫应答 | 第28-29页 |
| ·先天性免疫 | 第28页 |
| ·获得性免疫 | 第28-29页 |
| ·弓形虫病的预防与治疗 | 第29-34页 |
| ·弓形虫病的预防 | 第29页 |
| ·弓形虫病的治疗 | 第29-34页 |
| ·弓形虫病的诊断方法研究进展 | 第34-39页 |
| ·病原学检查 | 第34页 |
| ·免疫学检测 | 第34-36页 |
| ·分子生物学诊断 | 第36-37页 |
| ·目前我国弓形虫病检测试剂(盒)面临的问题 | 第37-39页 |
| ·抗体结合蛋白研究进展 | 第39-42页 |
| ·金黄色葡萄球菌蛋白A | 第39-41页 |
| ·链球菌G蛋白 | 第41-42页 |
| ·弓形虫体外培养的研究进展 | 第42-47页 |
| ·弓形虫体外培养概况 | 第42-43页 |
| ·弓形虫体外培养技术的应用 | 第43-46页 |
| ·展望 | 第46-47页 |
| 第二章 MIC3在大肠杆菌中的高效表达 | 第47-59页 |
| ·研究的目的意义 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-54页 |
| ·试验材料 | 第48-50页 |
| ·质粒、菌株、虫株及实验动物 | 第48页 |
| ·主要药品及试剂 | 第48页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第48-50页 |
| ·试验方法 | 第50-54页 |
| ·兔抗弓形虫高免血清的制备 | 第50-51页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·连接产物及质粒的转化 | 第51页 |
| ·质粒的小量制备(碱裂解法) | 第51页 |
| ·诱导表达 | 第51-52页 |
| ·最佳诱导表达条件的确定 | 第52页 |
| ·不溶性表达产物(包涵体)的提取、溶解和复性 | 第52页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第52-53页 |
| ·Western blot试验 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·克隆基因的选择 | 第54页 |
| ·重组质粒在E.coli中的表达与表达产物分析鉴定 | 第54-55页 |
| ·最佳诱导表达条件的确定 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第57页 |
| ·包涵体的提取和纯化 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第三章 动物弓形虫病SPA-ELISA及AG-ELISA诊断方法的建立 | 第59-87页 |
| ·研究的目的意义 | 第59页 |
| ·材料与方法 | 第59-64页 |
| ·试验材料 | 第59-61页 |
| ·试验动物 | 第59-60页 |
| ·主要药品及试剂 | 第60页 |
| ·血清 | 第60页 |
| ·ELISA缓冲液 | 第60-61页 |
| ·试验方法 | 第61-64页 |
| ·SPA-ELISA方法的建立 | 第61-62页 |
| ·AG-ELISA方法的建立评价 | 第62-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-82页 |
| ·SPA-ELISA方法的建立 | 第64-71页 |
| ·抗原最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定 | 第64页 |
| ·封闭液浓度及封闭时间的确定 | 第64-65页 |
| ·最适血清工作时间的确定 | 第65-66页 |
| ·酶标SPA最适浓度和最适作用时间的确定 | 第66-67页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第67页 |
| ·SPA-ELISA的结果判定 | 第67-68页 |
| ·特异性试验 | 第68页 |
| ·敏感性试验 | 第68-69页 |
| ·重复性试验 | 第69-70页 |
| ·保质期试验 | 第70页 |
| ·临床动物血清样品的检测 | 第70-71页 |
| ·AG-ELISA方法的建立 | 第71-82页 |
| ·抗原最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定 | 第71页 |
| ·HRP-AG最适浓度和最适作用时间的确定 | 第71-72页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第72-73页 |
| ·SPA-ELISA的结果判定 | 第73页 |
| ·特异性试验 | 第73-74页 |
| ·敏感性试验 | 第74页 |
| ·重复性试验 | 第74-75页 |
| ·保质期试验 | 第75页 |
| ·临床动物血清样品的检测 | 第75-76页 |
| ·AG-ELISA在人工感染猪血清弓形虫抗体检测中的应用 | 第76-81页 |
| ·AG-ELISA在临床血清弓形虫抗体检测中的实际应用 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-86页 |
| ·SPA-ELISA及AG-ELISA方法的建立 | 第82-83页 |
| ·ELISA方法的种属限制 | 第82页 |
| ·AG-ELISA及SPA-ELISA判定标准的制定 | 第82页 |
| ·AG-ELISA及SPA-ELIS诊断方法的评价 | 第82-83页 |
| ·试验条件的优化 | 第83-84页 |
| ·抗原对ELISA的特异性和敏感性的影响 | 第83页 |
| ·抗原包被浓度的影响 | 第83-84页 |
| ·血清对ELISA的特异性和敏感性的影响 | 第84页 |
| ·封闭液的选择 | 第84页 |
| ·ELISA操作方法的标准化 | 第84-86页 |
| ·加样 | 第84-85页 |
| ·温育 | 第85页 |
| ·洗涤 | 第85页 |
| ·比色 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第四章 弓形虫虫株分离及其耐药现象的初步研究 | 第87-104页 |
| ·研究的目的与意义 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-91页 |
| ·材料 | 第87-88页 |
| ·虫株、细胞、血清及实验动物 | 第87-88页 |
| ·主要溶液的配制 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-91页 |
| ·细胞的复苏和传代培养 | 第88-89页 |
| ·RH株速殖子培养上清的制备 | 第89页 |
| ·分离虫株所用细胞系的确定 | 第89页 |
| ·细胞培养分离虫体所需条件的优化 | 第89页 |
| ·野生虫株的分离 | 第89-90页 |
| ·分离虫株的进一步鉴定 | 第90-91页 |
| ·弓形虫磺胺耐药株的筛选及初步确定 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-100页 |
| ·细胞培养条件的优化 | 第91-92页 |
| ·野生虫株的分离及其鉴定 | 第92-97页 |
| ·临床样品的预处理 | 第92-94页 |
| ·野生虫株的分离 | 第94页 |
| ·弓形虫分离株的进一步鉴定 | 第94-97页 |
| ·弓形虫磺胺耐药株的筛选及初步确定 | 第97-100页 |
| ·弓形虫分离株的体外抑制试验 | 第97-98页 |
| ·弓形虫分离株的体内抑制试验 | 第98-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| ·细胞培养条件的优化 | 第100-101页 |
| ·样品的选择与处理 | 第101-102页 |
| ·弓形虫耐药性的初步确定 | 第102页 |
| ·小结 | 第102-104页 |
| 全文总结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
