中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
前言 | 第10-15页 |
参考文献 | 第12-15页 |
第1章 结核分支杆菌嵌合基因A9856a2 的原核表达、纯化及其抗原性分析 | 第15-29页 |
1 材料和方法 | 第16-21页 |
·材料 | 第16-17页 |
·菌株和质粒 | 第16页 |
·仪器设备 | 第16页 |
·酶和试剂 | 第16-17页 |
·引物的合成与测序 | 第17页 |
·方法 | 第17-21页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第17页 |
·引物的设计 | 第17页 |
·目的基因的PCR 扩增 | 第17页 |
·重组质粒的构建和转化 | 第17-19页 |
·A9856A2 的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第19-20页 |
·嵌合蛋白A9856A2 的纯化及透析 | 第20页 |
·免疫印迹分析 | 第20-21页 |
2 结果 | 第21-24页 |
·目的基因的获得 | 第21页 |
·目的基因的克隆与鉴定 | 第21-22页 |
·诱导pET856A2 表达及鉴定 | 第22-23页 |
·重组蛋白的纯化 | 第23页 |
·重组蛋白免疫印迹分析 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-25页 |
4 小结 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-29页 |
第2章 结核杆菌嵌合蛋白A9856A2单克隆抗体的制备和生物学鉴定 | 第29-49页 |
1 材料和方法 | 第30-38页 |
·材料 | 第30-31页 |
·主要试剂及耗材 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·主要溶液 | 第30-31页 |
·实验动物及细胞 | 第31页 |
·方法 | 第31-38页 |
·动物免疫 | 第31-32页 |
·间接ELISA 检测方法的建立 | 第32-33页 |
·细胞融合、筛选及单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第33-37页 |
·单克隆抗体的生物学性质鉴定 | 第37-38页 |
2 结果 | 第38-44页 |
·方阵ELISA 确定抗原包被量及血清稀释度 | 第38-40页 |
·血清效价 | 第40页 |
·融合及筛选情况 | 第40-42页 |
·单克隆抗体与所识别抗原的反应情况 | 第42页 |
·单克隆杂交瘤细胞培养上清效价 | 第42-43页 |
·单克隆抗体免疫球蛋白的亚类鉴定 | 第43页 |
·抗ESAT-6 单克隆抗体的交叉实验 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
4 本章小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
综述 | 第49-67页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-74页 |
致谢 | 第74页 |