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结核杆菌嵌合蛋白Ag856A2的原核表达、纯化、抗原性分析及其单克隆抗体的制备

中文摘要第1-4页
Abstract第4-10页
前言第10-15页
 参考文献第12-15页
第1章 结核分支杆菌嵌合基因A9856a2 的原核表达、纯化及其抗原性分析第15-29页
 1 材料和方法第16-21页
   ·材料第16-17页
     ·菌株和质粒第16页
     ·仪器设备第16页
     ·酶和试剂第16-17页
     ·引物的合成与测序第17页
   ·方法第17-21页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第17页
     ·引物的设计第17页
     ·目的基因的PCR 扩增第17页
     ·重组质粒的构建和转化第17-19页
     ·A9856A2 的诱导表达和SDS-PAGE 分析第19-20页
     ·嵌合蛋白A9856A2 的纯化及透析第20页
     ·免疫印迹分析第20-21页
 2 结果第21-24页
   ·目的基因的获得第21页
   ·目的基因的克隆与鉴定第21-22页
   ·诱导pET856A2 表达及鉴定第22-23页
   ·重组蛋白的纯化第23页
   ·重组蛋白免疫印迹分析第23-24页
 3 讨论第24-25页
 4 小结第25-26页
 参考文献第26-29页
第2章 结核杆菌嵌合蛋白A9856A2单克隆抗体的制备和生物学鉴定第29-49页
 1 材料和方法第30-38页
   ·材料第30-31页
     ·主要试剂及耗材第30页
     ·主要仪器第30页
     ·主要溶液第30-31页
     ·实验动物及细胞第31页
   ·方法第31-38页
     ·动物免疫第31-32页
     ·间接ELISA 检测方法的建立第32-33页
     ·细胞融合、筛选及单克隆杂交瘤细胞株的建立第33-37页
     ·单克隆抗体的生物学性质鉴定第37-38页
 2 结果第38-44页
   ·方阵ELISA 确定抗原包被量及血清稀释度第38-40页
   ·血清效价第40页
   ·融合及筛选情况第40-42页
   ·单克隆抗体与所识别抗原的反应情况第42页
   ·单克隆杂交瘤细胞培养上清效价第42-43页
   ·单克隆抗体免疫球蛋白的亚类鉴定第43页
   ·抗ESAT-6 单克隆抗体的交叉实验第43-44页
 3 讨论第44-46页
 4 本章小结第46-47页
 参考文献第47-49页
综述第49-67页
 参考文献第61-67页
附录第67-74页
致谢第74页

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