中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
第一章 绪论 | 第13-65页 |
·细胞凋亡及其信号转导 | 第13-46页 |
·细胞凋亡的概念及其基本特征 | 第13-14页 |
·凋亡、坏死及其它细胞死亡方式 | 第14-17页 |
·细胞凋亡的生理意义和发展前景 | 第17-18页 |
·细胞凋亡信号转导通路 | 第18-46页 |
·RIP家族蛋白 | 第46-61页 |
·概述 | 第46-47页 |
·RIP | 第47-52页 |
·RIP2 | 第52-55页 |
·RIP3 | 第55-59页 |
·RIP4 | 第59-61页 |
·选题的背景及意义 | 第61-65页 |
第二章 实验材料与方法 | 第65-74页 |
·实验材料 | 第65页 |
·常用实验技术及方法 | 第65-74页 |
·聚合酶链式反应(Polymerase chain Reaction,PCR) | 第65-66页 |
·基于PCR技术的定点突变 | 第66页 |
·DNA样品的琼脂糖凝胶电泳 | 第66-67页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第67页 |
·DNA的酶切、回收、连接与转化 | 第67-68页 |
·大肠杆菌质粒DNA的小规模抽提 | 第68页 |
·细胞培养和转染 | 第68-69页 |
·细胞凋亡率的测定 | 第69-70页 |
·收获细胞及处理蛋白样品 | 第70页 |
·蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第70-71页 |
·Western Blot | 第71-72页 |
·免疫沉淀 | 第72-73页 |
·体外剪切实验 | 第73页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第73-74页 |
第三章 研究结果 | 第74-105页 |
·tRIP3在QGY-7703细胞的凋亡通路中可能位于FADD的上游 | 第74-86页 |
·引言 | 第74-76页 |
·tRIP3能明显诱导QGY-7703细胞凋亡 | 第76-78页 |
·FADD-DN可以阻止tRIP3在QGY-7703细胞中诱导的凋亡 | 第78-80页 |
·RIP3-DN不能阻止FADD在QGY-7703细胞中诱导的凋亡 | 第80-81页 |
·tRIP3的两个保守氨基酸的突变不影响其凋亡活性 | 第81-84页 |
·分析与讨论 | 第84-86页 |
·RIP3剪切机制研究 | 第86-105页 |
·引言 | 第86-88页 |
·RIP3可以在凋亡刺激下被Caspase-8所剪切 | 第88-91页 |
·确定RIP3分子上的切割位点 | 第91-94页 |
·RIP3的剪切产物比全长RIP3更稳定 | 第94-96页 |
·RIP3的剪切产物表现出不同的细胞定位和凋亡活性 | 第96-98页 |
·RIP3的激酶活性对于它诱导caspase非依赖的凋亡是必需的 | 第98-101页 |
·RIP3的剪切产物表现出不同的NF-κB激活能力 | 第101-102页 |
·分析与讨论 | 第102-105页 |
第四章 工作总结 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-137页 |
附录 缩略语 | 第137-138页 |
致谢 | 第138-139页 |
攻读学位期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第139页 |