| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 1 绪论 | 第12-28页 |
| ·研究背景 | 第12-25页 |
| ·埃博霉素的发现和特点 | 第12-14页 |
| ·埃博霉素的合成方法 | 第14-16页 |
| ·埃博霉素生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·埃博霉素的临床进展 | 第18-21页 |
| ·纤维堆囊菌的研究进展 | 第21-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| ·研究的目标和内容 | 第25页 |
| ·创新之处 | 第25-28页 |
| 2 埃博霉素的发酵和纯化 | 第28-48页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| ·主要材料 | 第29-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·主要溶液配制 | 第29-30页 |
| ·主要方法 | 第30-33页 |
| ·菌种的保存和复苏 | 第30页 |
| ·固体培养基的选择 | 第30页 |
| ·优化发酵条件 | 第30-31页 |
| ·埃博霉素的检测方法 | 第31-32页 |
| ·分离和纯化 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-48页 |
| ·菌种的保存和复苏 | 第33-34页 |
| ·固体培养基的选择 | 第34-35页 |
| ·建立埃博霉素的检测体系 | 第35-40页 |
| ·发酵条件的优化 | 第40-43页 |
| ·分离和纯化 | 第43-48页 |
| 3 建立纤维堆囊菌的转化体系 | 第48-80页 |
| ·技术路线 | 第48页 |
| ·主要材料 | 第48-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·主要溶液配制 | 第49-50页 |
| ·主要方法 | 第50-62页 |
| ·基因组DNA 制备 | 第50-51页 |
| ·纤维堆囊菌So ce90 的抗性实验 | 第51页 |
| ·pRP-GFP 载体构建 | 第51-57页 |
| ·接合转移 | 第57页 |
| ·转化子的荧光检测 | 第57页 |
| ·转化子的PCR 检测 | 第57-58页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第58-61页 |
| ·转化子的稳定性 | 第61-62页 |
| ·结合转移的效率 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-80页 |
| ·纤维堆囊菌基因组DNA 提取 | 第62-63页 |
| ·纤维堆囊菌So ce90 的抗性实验 | 第63-65页 |
| ·pRP-GFP 的构建 | 第65-68页 |
| ·转化菌株的荧光显微观察 | 第68-70页 |
| ·转化菌株的PCR 鉴定 | 第70-71页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第71-75页 |
| ·转化子的稳定性 | 第75-76页 |
| ·结合转移的效率 | 第76-77页 |
| ·EpoPro 的启动活性分析 | 第77-78页 |
| ·pBBR1MCS 对纤维堆囊菌So ce90 的转化实验 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-86页 |
| ·埃博霉素发酵、纯化中存在的问题 | 第80-82页 |
| ·严格控制发酵时间 | 第80页 |
| ·树脂XAD-16 的利弊 | 第80-82页 |
| ·盐离子的监控 | 第82页 |
| ·纤维堆囊菌的结合转移策略 | 第82-86页 |
| ·质粒pRK415 的特点 | 第83页 |
| ·GFP 基因引入 | 第83-84页 |
| ·EpoPro 片段的引入 | 第84页 |
| ·载体pRP-GFP 应用前景 | 第84-86页 |
| 5 结论与展望 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 附录:博士期间论文发表情况 | 第98页 |