| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-33页 |
| 1 植物脂肪酸组成调控的研究进展 | 第12-21页 |
| ·植物脂肪酸脱饱和的基本途径 | 第12-14页 |
| ·与植物脂肪酸脱饱和相关的酶及基因 | 第14-18页 |
| ·去饱和酶的结构特点 | 第14-16页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶基因的克隆 | 第16-18页 |
| ·油酸脱氢酶FAD2的研究进展 | 第18-21页 |
| ·FAD2的性质 | 第18页 |
| ·FAD2活性调节 | 第18-19页 |
| ·FAD2基因家族 | 第19-21页 |
| 2 油菜脂肪酸研究进展 | 第21-25页 |
| ·油菜脂肪酸品质主要目标 | 第21-22页 |
| ·油菜脂肪酸成分及其遗传 | 第22-23页 |
| ·油菜脂肪酸品质改良的主要途径 | 第23-25页 |
| ·系统育种和杂交育种 | 第23页 |
| ·诱变育种 | 第23-24页 |
| ·脂肪酸基因工程 | 第24-25页 |
| ·脂肪酸碳链长度调控 | 第24页 |
| ·脂肪酸饱和度调控 | 第24-25页 |
| 3 消减抑制杂交(SSH)技术及其运用 | 第25-30页 |
| ·抑制消减杂交技术的基本原理及主要步骤 | 第26-27页 |
| ·SSH方法在植物上的应用 | 第27-30页 |
| 4 本研究的立题依据及技术路线 | 第30-33页 |
| ·本研究立题依据 | 第31页 |
| ·本研究技术路线 | 第31-33页 |
| 第二章 甘蓝型油菜fad2基因多个拷贝的分析 | 第33-46页 |
| 1 材料和方法 | 第33-39页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-39页 |
| ·CTAB法提取DNA | 第34-35页 |
| ·提取油菜总RNA | 第35-36页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第36页 |
| ·高效感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·湘油15号fad2基因的克隆 | 第36-38页 |
| ·湘油15号fad2基因碱基序列的分析 | 第38页 |
| ·设计序列差异引物进行RT-PCR分析 | 第38-39页 |
| ·序列差异引物的验证 | 第38页 |
| ·fad2基因的RT-PCR分析 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| ·总DNA及总RNA的提取效果 | 第39页 |
| ·湘油15号fad2基因克隆序列的分析 | 第39-43页 |
| ·fad2基因的RT-PCR分析结果 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·PCR产物测序发现基因多拷贝差异的可行性 | 第44页 |
| ·fad2 Ⅰ组与fad2 Ⅱ组 | 第44-45页 |
| ·fad2基因多拷贝在油菜高油酸育种中的意义 | 第45-46页 |
| 第三章 两个甘蓝型油菜突变材料种子发育过程中脂肪酸组成的研究 | 第46-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46-47页 |
| ·取样方法及甲酯化处理 | 第47页 |
| ·气相色谱仪分析 | 第47页 |
| 2 结果及分析 | 第47-50页 |
| ·各个脂肪酸的出峰时间 | 第47-48页 |
| ·种子发育过程中脂肪酸组成的气相色谱测定结果 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 甘蓝型油菜(B.napus)油酸突变体消减cDNA文库的构建及差异表达基因的分析 | 第53-81页 |
| 1 材料与方法 | 第53-64页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-64页 |
| ·总RNA的提取 | 第55页 |
| ·抑制消减杂交 | 第55-61页 |
| ·第一链的合成 | 第55-56页 |
| ·cDNA第一链的纯化 | 第56页 |
| ·合成cDNA第二链 | 第56-57页 |
| ·对第二链cDNA PCR产物进行纯化 | 第57页 |
| ·Rsa Ⅰ酶解双链cDNA及纯化 | 第57-58页 |
| ·接头连接 | 第58-59页 |
| ·第一轮杂交 | 第59-60页 |
| ·第二轮杂交 | 第60-61页 |
| ·第一轮选择性PCR | 第61页 |
| ·第二轮选择性PCR | 第61页 |
| ·正向消减抑制杂交文库的构建 | 第61-62页 |
| ·T-A克隆 | 第61-62页 |
| ·点杂交对文库进行筛选 | 第62-64页 |
| ·制备杂交探针 | 第62页 |
| ·点膜 | 第62-63页 |
| ·预杂交 | 第63页 |
| ·杂交 | 第63页 |
| ·洗膜 | 第63页 |
| ·信号检测 | 第63-64页 |
| ·差异表达克隆的确定 | 第64页 |
| ·差异表达基因cDNA片段的测序、分析 | 第64页 |
| ·差异表达基因的RT-PCR分析 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-73页 |
| ·总RNA提取效果 | 第64-65页 |
| ·第一链和第二链cDNA的合成 | 第65页 |
| ·消减杂交 | 第65页 |
| ·消减文库的构建和鉴定 | 第65-73页 |
| ·差异片段的克隆和分析 | 第65-66页 |
| ·斑点杂交结果 | 第66-68页 |
| ·测序结果及分析 | 第68-70页 |
| ·部分差异表达基因RT-PCR引物的设计 | 第70-72页 |
| ·部分差异表达基因的RT-PCR分析结果 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-81页 |
| ·抑制消减杂交技术 | 第73-74页 |
| ·硬脂酰-ACP脱氢酶对油酸的影响 | 第74-76页 |
| ·文库中其他已知功能的cDNA的分析 | 第76-78页 |
| ·影响油酸含量的因素是多方面的 | 第78-81页 |
| 全文总结和创新点 | 第81-83页 |
| 1 全文总结 | 第81页 |
| 2 本研究创新点 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简历 | 第97-98页 |
| 附录1 甘蓝型油菜湘油15基因组中11个fad2基因拷贝的序列比对 | 第98-104页 |
| 附录2 甘蓝型油菜湘油15基因组中11个FAD氨基酸序列比对 | 第104-107页 |
| 附录3 论文重要的英文缩写词 | 第107页 |
