摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 绪论 | 第11-40页 |
·启动子概述 | 第11-30页 |
·组成型启动子 | 第11-13页 |
·组织特异性启动子 | 第13-22页 |
·双向启动子和可变启动子 | 第22-24页 |
·环境诱导表达的启动子 | 第24-30页 |
·植物启动子的结构特征 | 第30-37页 |
·转录起始位点 | 第31页 |
·TATA 框 | 第31-33页 |
·CAAT 框 | 第33页 |
·GC 框 | 第33页 |
·G 盒保守序列 | 第33-34页 |
·其它重要的转录元件 | 第34-37页 |
·与启动子有关的网络信息资源 | 第37-38页 |
·启动子克隆的意义 | 第38-40页 |
2 花药原基组织特异性启动子的克隆 | 第40-91页 |
·启动子克隆的方法 | 第40-46页 |
·启动子的捕获技术 | 第40-42页 |
·克隆启动子的几套方案 | 第42-46页 |
·材料与试剂 | 第46-54页 |
·实验材料 | 第46-49页 |
·仪器和试剂 | 第49-54页 |
·启动子功能分析 | 第54-56页 |
·研究流程安排 | 第56-57页 |
·实验内容 | 第57-77页 |
·种子的发芽,播种和看护 | 第58-59页 |
·UidA 基因的鉴定分析 | 第59-62页 |
·叶片DNA 的提取 | 第62-64页 |
·植物DNA 样品的检测与保存 | 第64-66页 |
·总RNA 抽提(Trizol 法) | 第66-67页 |
·PCR 扩增的方法 | 第67-68页 |
·计算机辅助引物设计 | 第68-69页 |
·反向PCR(Inverted-PCR, I-PCR) | 第69页 |
·RT-PCR | 第69-72页 |
·DNA 片断回收 | 第72页 |
·重组质粒的连接及重组子筛选 | 第72-75页 |
·克隆的鉴定 | 第75-77页 |
·结果与讨论 | 第77-91页 |
·花药原基组织特异性启动子材料的组织化学检测 | 第77页 |
·花药原基组织特异性启动子材料的子代分析 | 第77-81页 |
·DNA 提取和保存 | 第81-82页 |
·组织特异性启动子材料的PCR 鉴定 | 第82-84页 |
·几种PCR 方法分离组织特异性启动子的结果及讨论 | 第84-88页 |
·序列测定及分析 | 第88-90页 |
·启动子的功能鉴定 | 第90-91页 |
3 花粉粒组织特异性启动子的鉴定和分离 | 第91-97页 |
·实验材料和方法 | 第91页 |
·结果与讨论 | 第91-97页 |
4 短细胞组织特异性启动子的鉴定和分析 | 第97-99页 |
·实验材料和方法 | 第97页 |
·结果与讨论 | 第97-99页 |
5 组成型启动子的鉴定和分析 | 第99-102页 |
·实验材料和方法 | 第99页 |
·结果与讨论 | 第99-102页 |
6 酶标探针的研制和应用 | 第102-111页 |
·材料与方法 | 第102-107页 |
·材料 | 第102-103页 |
·方法 | 第103-107页 |
·结果与讨论 | 第107-111页 |
·交联物的分离及其分析 | 第107-108页 |
·杂交条件的优化及稳定性测定 | 第108页 |
·灵敏度和特异性检测 | 第108页 |
·酶标探针的应用 | 第108-111页 |
7 感受态细胞制备及转化系统的改进 | 第111-123页 |
·感受态细胞制备及转化 | 第111-112页 |
·感受态细胞的制备 | 第111页 |
·感受态细胞的储存 | 第111-112页 |
·细菌的转化 | 第112页 |
·质粒DNA 的抽提 | 第112-115页 |
·质粒扩增及细菌转化系统的改进 | 第115-120页 |
·创新点及下一步的工作展望 | 第120-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-133页 |
附录1 攻读博士期间发表的论文 | 第133-134页 |