一种基于锚定PCR的微卫星筛选新方法的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-27页 |
| ·微卫星DNA | 第7-12页 |
| ·微卫星的发现 | 第7页 |
| ·微卫星的结构与分类 | 第7-8页 |
| ·微卫星的分布 | 第8页 |
| ·微卫星的特点 | 第8-9页 |
| ·微卫星的多态性机理 | 第9-10页 |
| ·微卫星的生物学功能 | 第10-12页 |
| ·微卫星的应用 | 第12-16页 |
| ·构建DNA指纹图 | 第12-13页 |
| ·构建基因图谱 | 第13页 |
| ·数量性状位点(QTL)定位 | 第13-14页 |
| ·亲权鉴定与品系鉴定 | 第14页 |
| ·群体遗传多样性的研究 | 第14页 |
| ·遗传病的预测及诊断 | 第14-15页 |
| ·濒危动物的保护 | 第15-16页 |
| ·微卫星的获得 | 第16-25页 |
| ·从公共数据库中查找微卫星位点 | 第16页 |
| ·从相近物种获得微卫星引物 | 第16-17页 |
| ·从基因组 DNA中筛选微卫星位点 | 第17-25页 |
| ·本研究的意义 | 第25-27页 |
| 2 材料、原理与方法 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验原理 | 第27-30页 |
| ·第一轮锚定PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·第二轮巢式PCR扩增 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·DNA提取 | 第30页 |
| ·DNA浓度测定 | 第30-31页 |
| ·3’端侧翼序列的获得 | 第31-36页 |
| ·5’端侧翼序列的获得 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-45页 |
| ·DNA提取的结果 | 第37页 |
| ·双引物扩增、回收的检测结果 | 第37页 |
| ·一次克隆检测的结果 | 第37-38页 |
| ·二次克隆检测的结果 | 第38页 |
| ·3’侧翼序列的测定结果 | 第38-39页 |
| ·5’侧翼序列的测定结果 | 第39页 |
| ·可用位点的分析结果 | 第39-45页 |
| 4 讨论 | 第45-51页 |
| ·本方法的优越性 | 第45-46页 |
| ·无需使用内切酶 | 第45页 |
| ·筛选位点的重复率低 | 第45页 |
| ·无需杂交富集 | 第45-46页 |
| ·本方法应用时需要注意的问题 | 第46-47页 |
| ·基因组 DNA的质量 | 第46页 |
| ·单引物的设计 | 第46页 |
| ·PCR产物检测 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆的检测 | 第47页 |
| ·出现的RAPD类似产物 | 第47页 |
| ·本方法需要继续完善的问题 | 第47-48页 |
| ·分离策略的最优化 | 第48-49页 |
| ·微卫星位点多态性评价 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
