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草莓再生体系的建立及导入chit42基因获得抗病种质的研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩写词表第9-15页
引言第15-17页
第一章 文献综述第17-35页
 1 草莓的遗传转化研究进展第17-28页
   ·草莓再生体系研究进展第17-22页
     ·叶盘再生不定芽途径第17-18页
     ·原生质体再生途径第18-19页
     ·花药培养第19-20页
     ·培养基和培养条件对再生的影响第20-21页
       ·基本培养基第20页
       ·植物生长调节剂第20-21页
       ·温度和光照第21页
     ·存在的问题及应对策略第21-22页
       ·基因型依赖性第21-22页
       ·供体母株和外植体的生理状态第22页
   ·草莓遗传转化体系研究进展第22-28页
     ·草莓遗传转化途径第22-25页
       ·农杆菌介导的遗传转化研究第22-24页
       ·DNA直接导入遗传转化的研究第24-25页
     ·草莓遗传转化所涉及的基因第25-26页
     ·影响转化率的几个主要因素第26-27页
       ·再生系统第26页
       ·农杆菌的侵染第26-27页
       ·外植体的脱菌培养第27页
       ·转化体的选择培养第27页
     ·问题与展望第27-28页
       ·转化率第27页
       ·外源基因整合的随机性第27-28页
 2 植物抗真菌病害基因工程研究进展第28-30页
 3 几丁质酶与真菌病害防治研究进展第30-35页
   ·几丁质酶的特性及分类第30-32页
   ·几丁质酶与植物防卫反应机制第32-33页
   ·植物转几丁质酶基因研究现状第33-35页
第二章 草莓离体再生体系的建立第35-62页
 1 材料和方法第35-38页
   ·试验材料第35页
   ·试验方法第35-36页
     ·无菌苗的培育及增殖培养第35页
     ·不定芽的再生培养第35-36页
     ·数据调查第36页
   ·试验设计方案与方法第36-38页
     ·基本培养基对不定芽再生的影响第36页
     ·植物生长调节剂的种类和浓度对不定芽再生的影响第36-37页
     ·不同外植体对不定芽再生的影响第37页
     ·叶片不同接种方式对不定芽再生的影响第37页
     ·不同叶龄对不定芽再生的影响第37页
     ·不同暗培养时间对不定芽再生的影响第37页
     ·组培苗的生根和移栽第37-38页
       ·继代培养及生根培养第37页
       ·再生植株的移栽第37-38页
 2 结果与分析第38-54页
   ·茎尖再生植株培养第38页
   ·叶片再生芽的生长动态第38页
   ·不同基本培养基对草莓离体叶片再生不定芽的影响第38-40页
   ·植物生长调节剂对草莓叶片不定芽再生的影响第40-49页
     ·6-BA与生长素类植物生长调节剂配合使用对不定芽再生的影响第40-45页
       ·6-BA与NAA配合使用对不定芽再生的影响第40-42页
       ·6-BA与2,4-D配合使用对不定芽再生的影响第42-44页
       ·6-BA与IBA配合使用对不定芽再生的影响第44-45页
     ·TDZ与生长素类植物生长调节剂配合使用对不定芽再生的影响第45-49页
       ·TDZ与NAA配合使用对不定芽再生的影响第45-46页
       ·TDZ与2,4-D配合使用对不定芽再生的影响第46-48页
       ·TDZ与IBA配合使用对不定芽再生的影响第48-49页
   ·不同外植体对不定芽再生的影响第49-50页
   ·叶盘接种方向对不定芽再生的影响第50-51页
   ·不同叶龄对不定芽再生的影响第51-52页
   ·不同暗培养时间对不定芽再生的影响第52-53页
   ·组培苗的生根和移栽第53-54页
     ·生根培养第53-54页
     ·炼苗移栽第54页
 3 讨论第54-60页
   ·基因型对草莓不定芽再生的影响第54页
   ·植物生长调节剂对草莓不定芽再生的影响第54-56页
   ·供体试管苗状态及叶片外植体与再生的关系第56-57页
     ·供体试管苗状态与叶片再生的关系第56页
     ·叶片外植体与叶片再生的关系第56-57页
   ·基本培养基对不定芽再生的影响第57页
   ·暗培养对不定芽再生的影响第57-58页
   ·其它因素对不定芽再生的影响第58-60页
     ·AgNO_3对不定芽再生的影响第58-59页
     ·光对不定芽再生的影响第59页
     ·转接培养与玻璃化问题第59页
     ·低温预处理对不定芽再生率的影响第59-60页
 4 小结第60-62页
第三章 农杆菌介导的chit42基因对草莓的转化第62-79页
 1 材料与方法第62-64页
   ·试验材料第62页
     ·植物材料第62页
     ·菌株与基因第62页
   ·试验方法第62-64页
     ·培养基第62-63页
     ·抗生素浓度的选择第63页
     ·农杆菌转化第63-64页
       ·农杆菌转化用培养基第63页
       ·农杆菌对外植体的转化第63-64页
       ·影响农杆菌转化效果的因素第64页
 2 结果与分析第64-73页
   ·抗生素敏感性试验第65-68页
     ·卡那霉素临界浓度的筛选第65-66页
     ·卡那霉素对不定芽伸长的影响第66页
     ·头孢霉素浓度对不定芽分化的影响第66-68页
     ·头孢霉素抑制农杆菌试验第68页
   ·不同影响因子对草莓转化的影响第68-73页
     ·基因型对草莓转化的影响第68-69页
     ·不同外植体类型对草莓转化的影响第69-70页
     ·预培养对草莓转化的影响第70页
     ·乙酰丁香酮(AS)对草莓转化的影响第70-71页
     ·菌液浓度对草莓转化的影响第71页
     ·侵染时间对草莓转化的影响第71-72页
     ·共培养时间对草莓转化的影响第72-73页
     ·选择方式对草莓转化的影响第73页
 3 讨论第73-77页
   ·抗生素的选择第74-75页
   ·预培养时间对转化效率的影响第75页
   ·AS对转化效率的影响第75页
   ·菌液浓度对转化效率的影响第75-76页
   ·侵染时间对转化效率的影响第76页
   ·共培养时间对转化效率的影响第76页
   ·筛选方式对转化效率的影响第76-77页
 4 小结第77-79页
第四章 草莓转基因植株的分子检测及抗病性鉴定第79-94页
 1 材料和方法第79-87页
   ·试验材料第79页
   ·试验方法第79-87页
     ·转基因草莓的PCR检测第79-82页
       ·药品配方第79-80页
       ·植物DNA提取步骤第80-81页
       ·PCR引物第81页
       ·扩增体系第81页
       ·扩增程序第81页
       ·电泳第81-82页
     ·转基因草莓的PCR-southern检测第82-86页
       ·植物总DNA提取第82页
       ·质粒提取第82-83页
       ·转化材料的PCR和电泳第83页
       ·转膜第83-84页
       ·杂交第84-86页
     ·转基因草莓的抗病性鉴定第86-87页
       ·病原菌的分离与纯化第86页
       ·转基因草莓离体叶盘接种病原菌的鉴定第86页
       ·转基因草莓活体接种病原菌的抗病性鉴定第86-87页
     ·转基因植株生物学性状观察第87页
 2 结果与分析第87-91页
   ·PCR分析结果第87-88页
   ·PCR-southern分析结果第88-89页
   ·转基因草莓的抗病性鉴定第89-90页
     ·转基因草莓离体叶盘接种灰霉病菌的抗病性分析第89页
     ·转基因草莓活体接种病原菌的抗病性分析第89-90页
   ·转基因植株生物学性状观察第90-91页
 3 讨论第91-92页
   ·PCR检测假阳性和非特异性第91页
   ·关于Southern杂交第91页
   ·关于离体与活体接种病原菌进行抗病性鉴定的比较第91-92页
   ·关于转基因植株的鉴定及表达第92页
 4 小结第92-94页
图版第94-98页
参考文献第98-107页
致谢第107-108页
作者简历第108-109页
在读期间发表的论文第109页

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