摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
引言 | 第9-11页 |
材料与方法 | 第11-19页 |
1.材料 | 第11-13页 |
·供试植物材料 | 第11页 |
·菌种与质粒 | 第11页 |
·试剂 | 第11页 |
·引物 | 第11-13页 |
2.方法 | 第13-19页 |
·甜瓜总RNA提取 | 第13页 |
·甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA的克隆 | 第13-15页 |
·cDNA第一链合成 | 第13-14页 |
·PCR扩增获得Cm-ETR1 cDNA片段 | 第14页 |
·连接反应 | 第14页 |
·转化 | 第14页 |
·转化子的筛选 | 第14-15页 |
·重组质粒的PCR检测 | 第15页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第15页 |
·测序 | 第15页 |
·突变体克隆载体构建 | 第15-17页 |
·重叠延伸PCR扩增获得五个突变体全长cDNA片段 | 第15-16页 |
·连接反应 | 第16页 |
·转化 | 第16页 |
·转化子的快速提取质粒筛选及PCR检测 | 第16页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第16-17页 |
·测序 | 第17页 |
·突变体表达载体构建 | 第17-18页 |
·质粒DNA的制备 | 第17页 |
·酶切反应 | 第17-18页 |
·连接反应 | 第18页 |
·转化 | 第18页 |
·重组质粒的PCR检测和酶切鉴定 | 第18页 |
·花粉管通道法导入突变体 | 第18-19页 |
·突变体表达载体的大量制备 | 第18页 |
·花粉管通道法导入 | 第18-19页 |
·T_0代植株的检测 | 第19页 |
结果与分析 | 第19-30页 |
1.cDNA克隆 | 第19-24页 |
·甜瓜总RNA提取 | 第19-20页 |
·RT-PCR扩增获得甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1全长cDNA片段 | 第20页 |
·双酶切鉴定 | 第20-21页 |
·甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA序列分析 | 第21-24页 |
2.突变体克隆载体构建 | 第24-27页 |
·重叠延伸PCR扩增获得突变体全长cDNA片段 | 第24页 |
·突变体重组质粒的筛选 | 第24-26页 |
·测序结果 | 第26-27页 |
3.突变体表达载体构建 | 第27-28页 |
4.T_0代植株的检测 | 第28-30页 |
讨论 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-34页 |
文献综述 | 第34-49页 |
致谢 | 第49页 |