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甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1全长cDNA的克隆、突变体构建及转化

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
引言第9-11页
材料与方法第11-19页
 1.材料第11-13页
     ·供试植物材料第11页
     ·菌种与质粒第11页
     ·试剂第11页
     ·引物第11-13页
 2.方法第13-19页
     ·甜瓜总RNA提取第13页
     ·甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA的克隆第13-15页
       ·cDNA第一链合成第13-14页
       ·PCR扩增获得Cm-ETR1 cDNA片段第14页
       ·连接反应第14页
       ·转化第14页
       ·转化子的筛选第14-15页
       ·重组质粒的PCR检测第15页
       ·重组质粒的酶切鉴定第15页
       ·测序第15页
     ·突变体克隆载体构建第15-17页
       ·重叠延伸PCR扩增获得五个突变体全长cDNA片段第15-16页
       ·连接反应第16页
       ·转化第16页
       ·转化子的快速提取质粒筛选及PCR检测第16页
       ·重组质粒的酶切鉴定第16-17页
       ·测序第17页
     ·突变体表达载体构建第17-18页
       ·质粒DNA的制备第17页
       ·酶切反应第17-18页
       ·连接反应第18页
       ·转化第18页
       ·重组质粒的PCR检测和酶切鉴定第18页
     ·花粉管通道法导入突变体第18-19页
       ·突变体表达载体的大量制备第18页
       ·花粉管通道法导入第18-19页
     ·T_0代植株的检测第19页
结果与分析第19-30页
 1.cDNA克隆第19-24页
     ·甜瓜总RNA提取第19-20页
     ·RT-PCR扩增获得甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1全长cDNA片段第20页
     ·双酶切鉴定第20-21页
     ·甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA序列分析第21-24页
 2.突变体克隆载体构建第24-27页
     ·重叠延伸PCR扩增获得突变体全长cDNA片段第24页
     ·突变体重组质粒的筛选第24-26页
     ·测序结果第26-27页
 3.突变体表达载体构建第27-28页
 4.T_0代植株的检测第28-30页
讨论第30-32页
参考文献第32-34页
文献综述第34-49页
致谢第49页

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