| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 英文缩略词及中文对照表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1 蛋白酶的来源 | 第15-16页 |
| ·植物蛋白酶 | 第15页 |
| ·动物蛋白酶 | 第15页 |
| ·微生物蛋白酶 | 第15-16页 |
| 2 蛋白酶的分类 | 第16-18页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第17页 |
| ·天冬氨酸蛋白酶 | 第17-18页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶 | 第18页 |
| ·金属蛋白酶 | 第18页 |
| 3 蛋白酶的生理学功能 | 第18-21页 |
| ·蛋白质的周转 | 第19页 |
| ·孢子形成和分生孢子的释放 | 第19页 |
| ·萌发 | 第19页 |
| ·酶的修饰 | 第19-20页 |
| ·营养 | 第20页 |
| ·基因表达的调控 | 第20-21页 |
| 4 蛋白酶的应用 | 第21-23页 |
| ·用于洗涤剂 | 第21页 |
| ·皮革工业 | 第21-22页 |
| ·食品工业 | 第22页 |
| ·医药和化妆品 | 第22-23页 |
| ·其他应用 | 第23页 |
| 5 蛋白酶的纯化方法 | 第23-25页 |
| 6 微生物蛋白酶的基因工程 | 第25-28页 |
| 7 蛋白质工程 | 第28-30页 |
| 8 展望 | 第30-31页 |
| 选题的目的意义、研究内容、技术路线 | 第31-33页 |
| 1 选题的目的意义 | 第31页 |
| 2 研究内容 | 第31-32页 |
| 3 技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 嗜热毛壳菌（CHAETOMIUM THERMOPHILUM）热稳定蛋白酶的纯化及特性 | 第33-52页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·不同培养时间对蛋白酶活性的影响 | 第39-40页 |
| ·酶的分离纯化 | 第40-43页 |
| ·蛋白酶的特性研究 | 第43-48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| ·Chaetomium thermophilum 蛋白酶的纯化 | 第48页 |
| ·Chaetomium thermophilum 蛋白酶的纯化时的样品处理 | 第48-49页 |
| ·Chaetomium thermophilum 蛋白酶的特性分析 | 第49-51页 |
| ·Chaetomium thermophilum 蛋白酶的应用潜力和存在的问题 | 第51-52页 |
| 第三章 嗜热毛壳菌热稳定性蛋白酶基因的CDNA 克隆及其序列分析 | 第52-103页 |
| 1 材料和方法 | 第52-68页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·目的基因cDNA 中间片段的分离 | 第53-67页 |
| ·嗜热毛壳菌丝氨酸蛋白酶基因组DNA 的克隆 | 第67-68页 |
| 2. 结果与分析 | 第68-96页 |
| ·蛋白酶cDNA 基因的分离 | 第68-74页 |
| ·Chaetomium thermophilum 蛋白酶基因组DNA 的扩增 | 第74-76页 |
| ·蛋白酶基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第76-93页 |
| ·Thermomyces lanuginosus 丝氨酸蛋白酶基因片段的克隆及序列分析 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-103页 |
| ·用PCR 及RACE 技术分离基因 | 第96-100页 |
| ·蛋白酶基因PRO 结构 | 第100-103页 |
| 第四章 CHAETOMIUM THERMOPHILUM 热稳定蛋白酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达 | 第103-139页 |
| 1. 材料和方法 | 第104-114页 |
| ·材料 | 第104-105页 |
| ·试验方法 | 第105-114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-134页 |
| ·蛋白酶PRO 成熟肽基因序列的限制性酶切位点分析结果 | 第114-116页 |
| ·蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第116-119页 |
| ·蛋白酶基因PRO 在毕赤酵母中的表达 | 第119-134页 |
| 3 讨论 | 第134-139页 |
| ·表达系统的选择 | 第134-135页 |
| ·利用限制性内切酶酶切外源基因、载体，构建表达载体时需要注意的问题 | 第135-137页 |
| ·线性化的原因及不同线性化方式的影响 | 第137页 |
| ·表达工程菌的培养条件 | 第137-139页 |
| 第五章 结论和建议 | 第139-141页 |
| 1 结论 | 第139页 |
| 2 建议 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-164页 |
| 致谢 | 第164-165页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第165页 |
