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萝芙木(Rauvolfia verticillata(Lour.)Baill.)毛状根外源基因表达系统的建立

缩写词表第1-11页
第一部分 文献综述第11-26页
 1 萜类吲哚生物碱的代谢工程第11-16页
   ·TIAs生物合成上游途径中的关键酶TDC和STR及其应用第15-16页
     ·色氨酸脱羧酶(Tryptophan decarboxylase,TDC)第15页
     ·异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase,STR)第15-16页
     ·香叶醇-10-脱氢酶(Geraniol 10-hydroxylase,G10H)第16页
 2 转基因毛状根的研究第16-22页
   ·发根农杆菌和Ri T-DNA基因第17-18页
   ·次生代谢产物生产第18-20页
   ·植株再生第20-21页
   ·遗传操作第21-22页
 3 萝芙木及降压药物的研究进展第22-26页
   ·萝芙木的生物学特征第22-23页
   ·降压药物的研究第23-24页
   ·萝芙木属植物的研究第24-26页
第二部分 引言第26-27页
第三部分 发根农杆菌介导的萝芙木遗传转化体系的建立第27-39页
 1 材料和方法第27-29页
   ·实验材料第27页
     ·植物材料第27页
     ·细菌菌株第27页
     ·培养基第27页
   ·实验方法第27-29页
     ·无菌系统的建立第27-28页
     ·菌种的保存与活化第28页
     ·外植体的转化第28-29页
     ·毛状根的分离和培养第29页
 2 结果与讨论第29-39页
   ·萝芙木无菌系统的建立第29-30页
   ·外植体抗生素Cef的敏感性实验第30页
   ·发根农杆菌介导的萝芙木遗传转化条件的优化第30-36页
     ·不同类型外植体对诱导频率的影响第30-32页
     ·菌液浓度对转化频率的影响第32-33页
     ·菌液浸染时间对诱导率的影响第33页
     ·预培养时间对诱导频率的影响第33-34页
     ·共培养时间对诱导频率的影响第34-35页
     ·诱导信号分子对诱导频率的影响第35-36页
   ·毛状根的形态学鉴定第36-37页
   ·毛状根的分离、离体培养和优良无性系的选择第37-39页
第四部分 转基因毛状根的分子检测和利血平含量检测第39-46页
 1 材料和方法第39-42页
   ·实验材料第39页
   ·实验方法第39-42页
     ·转基因萝芙木毛状根的PCR检测第39-41页
       ·毛状根DNA的提取第39-40页
       ·农杆菌质粒DNA的提取第40页
       ·PCR检测目的基因第40-41页
     ·利血平的含量测定与比较第41-42页
       ·仪器与试剂第41页
       ·色谱条件第41页
       ·对照品溶液的制备和标准曲线的制作第41页
       ·样品测定第41-42页
 2 结果与讨论第42-46页
   ·转基因萝芙木毛状根的PCR检测第42-44页
   ·萝芙木毛状根中利血平含量测定与比较第44-46页
     ·线性关系试验第44页
     ·精密度试验第44页
     ·重复性试验第44页
     ·稳定性试验第44页
     ·回收率测定第44页
     ·样品测定第44-46页
第五部分 结论第46-48页
参考文献第48-58页
附录Ⅰ 标准曲线及利血平对照品的HPLC图谱第58-59页
附录Ⅱ 样品的HPLC图谱第59-60页
致谢第60页

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