中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-24页 |
·DNA 甲基化与肿瘤 | 第9-11页 |
·DNA 甲基化的概述 | 第9-10页 |
·DNA 甲基化引发肿瘤的机制 | 第10页 |
·DNA 甲基化检测方法 | 第10-11页 |
·MGMT 基因与结直肠肿瘤 | 第11-15页 |
·MGMT 基因及其蛋白结构、功能 | 第11-12页 |
·结直肠肿瘤发生发展的分子机制 | 第12-13页 |
·MGMT 基因甲基化与结直肠癌的发生发展 | 第13-15页 |
·基因芯片技术与肿瘤研究 | 第15-20页 |
·基因芯片及其意义 | 第15-18页 |
·基因芯片的原理及制备 | 第18页 |
·基因芯片在肿瘤研究中的应用 | 第18-20页 |
参考文献 | 第20-24页 |
第二章 MGMT 基因多位点甲基化定量检测芯片的制备及标准曲线的绘制 | 第24-45页 |
·正常组织DNA 的抽提与亚硫酸氢钠处理 | 第24-28页 |
·酚-氯仿法提取外周血DNA | 第24-26页 |
·样本DNA 的亚硫酸氢钠处理 | 第26-28页 |
·基因芯片的制备 | 第28-34页 |
·固相载体的处理 | 第28-30页 |
·探针分子的联接与固定 | 第30-32页 |
·探针的设计 | 第32-34页 |
·多CpG 位点的荧光强度标准曲线的绘制 | 第34-44页 |
·甲基化阳性和阴性克隆的获取 | 第34-38页 |
·标准曲线的绘制 | 第38-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第三章 MGMT、P53 基因在结直肠癌发生和进展中的意义 | 第45-61页 |
·材料与方法 | 第45-51页 |
·标本来源 | 第45-46页 |
·DNA 的抽提与亚硫酸氢钠处理 | 第46页 |
·样本DNA 的PCR 扩增 | 第46-48页 |
·甲基化芯片杂交 | 第48-49页 |
·免疫组化(EnVision 两步法) | 第49-51页 |
·结果 | 第51-56页 |
·MGMT 甲基化芯片杂交结果 | 第51-55页 |
·免疫组化结果 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-61页 |
结论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第62-64页 |
附录1:主要试剂的配制 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |