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应用超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素(A)突变体诱导肿瘤细胞凋亡的细胞免疫研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-11页
第一章.前言第11-19页
第二章.实验材料第19-23页
第三章.实验方法第23-33页
 一.SEA及其突变体SEA-H61D的克隆,表达及纯化制备第23-24页
 二.体外抗肿瘤活性第24-28页
  1.细胞培养第24页
  2.人外周血淋巴细胞(PBMC)提取第24页
  3.C57小鼠脾细胞悬液制备第24页
  4.共培养实验第24-25页
  5.突变体SEA-H61D与重组型SEA,SEC及高聚生的活性比较第25-26页
  6.不同效靶比下SEA-H61D对肿瘤细胞的杀伤第26页
  7.MAPK途径中各酶抑制剂对SEA-H61D抑瘤活性的抑制作用第26页
  8.超抗原诱导肿瘤细胞调亡的流式细胞检测第26-27页
  9.超抗原SEA-H61D刺激人PBMCs分泌IFN-γ分泌第27-28页
  10.SEA-H61D对PBMC或C57BL/6小鼠脾细胞的增殖诱导活性第28页
 三.体内实验第28-33页
  1.超抗原SEA-H61D对小鼠不同肿瘤生长的影响第28-30页
  2.升高Babl/c小鼠体内白细胞的作用第30页
  3.Babl/c小鼠体内升白实验第30-31页
  4.SEA-H61D增加小鼠外周血内CD4+,CD8+细胞水平第31页
  5.最大耐受量实验第31页
  6.长期毒性实验预试第31-32页
  7.幼猫催吐实验第32-33页
第四章.结果第33-50页
 一.SEA-H61D蛋白的构建、表达纯化第33-34页
  1.SEA-H61D蛋白的基因构建第33页
  2.PRSET-SEA-H61D表达载体的构建第33页
  3.SEA-H61D的原核表达第33页
  4.Western Blot结果第33页
  5.SEA-H61D的分离与纯化第33-34页
 二.体外实验第34-43页
  1.共培养实验第34-40页
  2.流式细胞术检测SEA-H61D对非贴壁肿瘤细胞K562的杀伤第40-41页
  3.IFN-γ测定第41-42页
  4.超抗原SEA-H61D对PBLs或C57BL/6小鼠脾细胞的增殖诱导活性第42-43页
 三.体内实验第43-50页
  1.超抗原SEA-H61D对小鼠不同肿瘤生长的抑制作用第43-46页
  2.超抗原SEA-H61D在不同时间点对Babl/c小鼠白细胞的增殖作用第46-47页
  3.超抗原SEA-H61D对Babl/c小鼠白细胞的增殖第47页
  4.SEA-H61D升高小鼠外周血内CD4、CD8细胞研究第47-48页
  5.最大耐受量实验第48-49页
  6.长期毒性实验预试第49页
  7.幼猫催吐实验结果第49-50页
第五章.结论第50-51页
第六章.讨论第51-53页
参考文献第53-58页
致谢第58页

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