中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
第一章.前言 | 第11-19页 |
第二章.实验材料 | 第19-23页 |
第三章.实验方法 | 第23-33页 |
一.SEA及其突变体SEA-H61D的克隆,表达及纯化制备 | 第23-24页 |
二.体外抗肿瘤活性 | 第24-28页 |
1.细胞培养 | 第24页 |
2.人外周血淋巴细胞(PBMC)提取 | 第24页 |
3.C57小鼠脾细胞悬液制备 | 第24页 |
4.共培养实验 | 第24-25页 |
5.突变体SEA-H61D与重组型SEA,SEC及高聚生的活性比较 | 第25-26页 |
6.不同效靶比下SEA-H61D对肿瘤细胞的杀伤 | 第26页 |
7.MAPK途径中各酶抑制剂对SEA-H61D抑瘤活性的抑制作用 | 第26页 |
8.超抗原诱导肿瘤细胞调亡的流式细胞检测 | 第26-27页 |
9.超抗原SEA-H61D刺激人PBMCs分泌IFN-γ分泌 | 第27-28页 |
10.SEA-H61D对PBMC或C57BL/6小鼠脾细胞的增殖诱导活性 | 第28页 |
三.体内实验 | 第28-33页 |
1.超抗原SEA-H61D对小鼠不同肿瘤生长的影响 | 第28-30页 |
2.升高Babl/c小鼠体内白细胞的作用 | 第30页 |
3.Babl/c小鼠体内升白实验 | 第30-31页 |
4.SEA-H61D增加小鼠外周血内CD4+,CD8+细胞水平 | 第31页 |
5.最大耐受量实验 | 第31页 |
6.长期毒性实验预试 | 第31-32页 |
7.幼猫催吐实验 | 第32-33页 |
第四章.结果 | 第33-50页 |
一.SEA-H61D蛋白的构建、表达纯化 | 第33-34页 |
1.SEA-H61D蛋白的基因构建 | 第33页 |
2.PRSET-SEA-H61D表达载体的构建 | 第33页 |
3.SEA-H61D的原核表达 | 第33页 |
4.Western Blot结果 | 第33页 |
5.SEA-H61D的分离与纯化 | 第33-34页 |
二.体外实验 | 第34-43页 |
1.共培养实验 | 第34-40页 |
2.流式细胞术检测SEA-H61D对非贴壁肿瘤细胞K562的杀伤 | 第40-41页 |
3.IFN-γ测定 | 第41-42页 |
4.超抗原SEA-H61D对PBLs或C57BL/6小鼠脾细胞的增殖诱导活性 | 第42-43页 |
三.体内实验 | 第43-50页 |
1.超抗原SEA-H61D对小鼠不同肿瘤生长的抑制作用 | 第43-46页 |
2.超抗原SEA-H61D在不同时间点对Babl/c小鼠白细胞的增殖作用 | 第46-47页 |
3.超抗原SEA-H61D对Babl/c小鼠白细胞的增殖 | 第47页 |
4.SEA-H61D升高小鼠外周血内CD4、CD8细胞研究 | 第47-48页 |
5.最大耐受量实验 | 第48-49页 |
6.长期毒性实验预试 | 第49页 |
7.幼猫催吐实验结果 | 第49-50页 |
第五章.结论 | 第50-51页 |
第六章.讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58页 |