| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-20页 |
| 1. 中华蜜蜂 | 第14页 |
| 2. 工蜂毒腺 | 第14-16页 |
| 3. 蜂毒的成分和研究现状 | 第16-17页 |
| 4. EST 技术及应用 | 第17-19页 |
| ·原理 | 第17-18页 |
| ·EST技术 | 第18页 |
| ·EST技术的应用 | 第18-19页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第一部分 中华蜜蜂（Apis cerana）毒腺cDNA 文库的构建 | 第20-33页 |
| 1. 材料与方法 | 第20-31页 |
| ·蜜蜂 | 第20页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·蜂毒毒腺总RNA的抽提 | 第21页 |
| ·中蜂毒腺cDNA文库的构建 | 第21-30页 |
| ·mRNA抽提 | 第21-22页 |
| ·cDNA 合成的简要流程 | 第22-23页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第23页 |
| ·补平cDNA中缺口 | 第23-24页 |
| ·连接EcoRⅠ接头 | 第24页 |
| ·EcoRⅠ末端磷酸化 | 第24-25页 |
| ·XhoⅠ消化 | 第25页 |
| ·组装层析柱 | 第25页 |
| ·凝胶装柱 | 第25-26页 |
| ·收集样品组分 | 第26页 |
| ·cDNA样品加工 | 第26-27页 |
| ·cDNA与Uni-ZAP XR 载体连接 | 第27页 |
| ·制备宿主菌 | 第27页 |
| ·体外包装 | 第27-28页 |
| ·检测滴度 | 第28页 |
| ·体外切割 | 第28-30页 |
| ·小量质粒提取方法 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| 2. 结果分析 | 第31-33页 |
| ·总RNA提取结果 | 第31页 |
| ·文库的滴度 | 第31-32页 |
| ·PCR检测结果 | 第32-33页 |
| 第二部分 中华蜜蜂毒腺的表达序列标签（EST）分析 | 第33-48页 |
| 1. 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·中蜂毒腺cDNA文库 | 第33页 |
| ·大批量质粒抽提(96孔板) | 第33-34页 |
| ·细菌的培养 | 第33页 |
| ·抽提 | 第33-34页 |
| ·保种 | 第34页 |
| ·抽提 | 第34页 |
| ·电泳 | 第34页 |
| ·中蜂毒腺cDNA文库的EST测序 | 第34页 |
| ·序列分析及Genbank数据库查询 | 第34-35页 |
| ·序列处理及EST的拼装 | 第34页 |
| ·EST的Genbank数据库查询 | 第34-35页 |
| 2. 结果分析与讨论 | 第35-48页 |
| ·抽提质粒结果检测 | 第35页 |
| ·测序结果概况 | 第35-36页 |
| ·中蜂毒腺cDNA文库中已有功能注释的基因分类 | 第36-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第三部分 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第60页 |