| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-17页 |
| ·课题的研究背景和目的 | 第14-15页 |
| ·课题研究背景 | 第14-15页 |
| ·课题研究目的 | 第15页 |
| ·课题的研究内容和意义 | 第15页 |
| ·课题研究内容 | 第15页 |
| ·课题研究意义 | 第15页 |
| ·论文主要内容和组织 | 第15-17页 |
| 第2章 FoxM1c的生物信息分析 | 第17-25页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·实验序列来源 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-20页 |
| ·多重序列比对ClusterX1.81 | 第19页 |
| ·序列同源性分析(构建进化树TREEVIEW) | 第19-20页 |
| ·保守结构域预测、分析以及Blast搜索与新物种的探究 | 第20页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第20-24页 |
| ·多重序列比对结果 | 第20-21页 |
| ·进化树构建与评估 | 第21-22页 |
| ·保守结构域预测、分析以及Blast搜索 | 第22-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第3章 人重组FoxM1c表达载体的构建、鉴定及其DNA结合区的诱导表达与纯化 | 第25-46页 |
| ·引言 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-30页 |
| ·实验方法 | 第30-39页 |
| ·实验路线 | 第30-31页 |
| ·人类FoxM1c全长cDNA质粒的检测 | 第31-33页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·PCR产物的回收 | 第34页 |
| ·PCR扩增产物的连接 | 第34-35页 |
| ·全长重组克隆质粒的提取 | 第35页 |
| ·全长重组克隆质粒双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·pQE30载体的酶切 | 第35页 |
| ·载体与外源片段的连接及转化 | 第35-36页 |
| ·转化克隆的酶切及测序鉴定 | 第36页 |
| ·DNA结合区片段与转录激活区片段的重组载体构建 | 第36页 |
| ·重组质粒工程菌的诱导表达 | 第36页 |
| ·重组质粒工程菌的诱导表达及细胞破碎 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE凝胶的制备 | 第37页 |
| ·电泳、染色及脱色 | 第37页 |
| ·使用Ni-NTA分离纯化目的蛋白 | 第37-38页 |
| ·纯化后目的蛋白电泳检测 | 第38页 |
| ·Ni-NTA回收再生 | 第38-39页 |
| ·实验结果与分析 | 第39-44页 |
| ·人类FoxM1c全长cDNA质粒的检测 | 第39-40页 |
| ·全长重组克隆质粒双酶切鉴定 | 第40页 |
| ·pQE30载体的酶切 | 第40-41页 |
| ·重组表达载体pQ-FoxM1c双酶切 | 第41页 |
| ·DNA结合区片段与转录激活区片段的重组载体构建 | 第41-42页 |
| ·重组质粒工程菌的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·重组质粒工程菌的诱导表达最佳时间及目的蛋白的纯化的摸索 | 第43页 |
| ·目的蛋白分离纯化 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白定量结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第4章 靶向FoxM1c DNA结合区蛋白的噬菌体随机肽库筛选 | 第46-55页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·主要试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·噬菌体结合目的蛋白及亲和力竞争洗脱 | 第49页 |
| ·滴度测定 | 第49-50页 |
| ·噬菌体扩增 | 第50页 |
| ·ssDNA提取及测序 | 第50-51页 |
| ·噬菌体亲和力测定 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-53页 |
| ·噬菌体十二肽筛选及亲和力测定结果 | 第51页 |
| ·结合肽序列测定与分析 | 第51-53页 |
| ·18条噬菌体结合肽序列的多重序列比对 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·结论 | 第53-55页 |
| 第5章 筛选肽与FOXM1C的分子对接与模拟 | 第55-64页 |
| ·实验方法与结果 | 第55-62页 |
| ·人类FoxM1c蛋白三级结构的获得 | 第55页 |
| ·分子对接 | 第55-56页 |
| ·FoxM1c的DNA结合区的分子对接 | 第56-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 综述 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
