致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-18页 |
1. Sir2基因家族的酶学功能和蛋白质结构 | 第7-9页 |
·酶学功能 | 第7页 |
·蛋白质结构 | 第7-9页 |
2. Sir2基因家族的功能 | 第9-10页 |
3. Sir2基因家族的作用机制 | 第10-16页 |
·酵母Sir2基因的作用机制 | 第10-14页 |
·哺乳动物SIRT1基因的作用机制 | 第14-16页 |
4. 结束语 | 第16-18页 |
第二章 实验材料和方法 | 第18-28页 |
1. 实验材料 | 第18页 |
2. 实验所需试剂及缓冲液的配置 | 第18-19页 |
3. 实验方法 | 第19-28页 |
·AtSIRT1突变体测序 | 第19页 |
·载体构建 | 第19-23页 |
·转基因及转基因植物的筛选 | 第23-24页 |
·在原核生物中过量表达目的蛋白 | 第24-28页 |
第三章 结果与讨论 | 第28-50页 |
1. 实验结果 | 第28-45页 |
·AtSIRT1及 AtSIRT2突变体 | 第28-29页 |
·AtSIRT1及 AtSIRT2突变体表型及表型模写 | 第29-31页 |
·AtSIRT1,AtSIRT2启动子-报告基因质粒构建 | 第31-32页 |
·AtSIRT1,AtSIRT2融合蛋白载体的构建 | 第32-34页 |
·融合蛋白在拟南芥中的瞬时表达及亚细胞定位 | 第34-40页 |
·AtSIRT1,AtSIRT2及其突变体蛋白质空间结构预测 | 第40-42页 |
·在大肠杆菌中过量表达 AtSIRT2蛋白 | 第42-44页 |
·AtSIRT2蛋白体外酶学活性分析 | 第44-45页 |
2. 讨论 | 第45-50页 |
·突变体表型分析 | 第45页 |
·报告基因简介 | 第45-46页 |
·pCAMBIA1303构建的启动子-报告基因载体表达失败的原因分析 | 第46-47页 |
·AtSIRT1,AtSIRT2融合蛋白的亚细胞定位 | 第47-48页 |
·基因的瞬时表达及稳定表达 | 第48页 |
·AtSIRT蛋白的结构及功能 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-57页 |