致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-23页 |
一、SPX结构域的研究进展 | 第10-13页 |
1 SPX结构域的命名 | 第10-11页 |
2 真核生物中磷和铁信号途径相关的SPX蛋白 | 第11-13页 |
二、植物磷反应信号传导机制的研究进展 | 第13-18页 |
1 转录水平的调控 | 第13-15页 |
2 转录后水平的调控 | 第15-17页 |
3 其它磷胁迫下差异表达基因 | 第17-18页 |
三、植物铁的信号途径 | 第18-19页 |
1 植物NRAMP家族 | 第18页 |
2 植物铁蛋白 | 第18-19页 |
四、植物铁信号与磷信号途径的互作 | 第19-23页 |
第二部分 研究结果 | 第23-45页 |
一、拟南芥AtSPX1基因结构及蛋白序列分析 | 第23-27页 |
1 实验方法 | 第23-24页 |
2 实验结果 | 第24-27页 |
二、AtSPX1基因的表达模式和亚细胞定位研究 | 第27-38页 |
1 实验材料 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-34页 |
半定量RT-PCR | 第27-28页 |
AtSPX1P::GUS载体构建 | 第28-29页 |
制备电转化农杆菌感受态菌体 | 第29页 |
电转化(Electroporator 2510,EPPENDORF) | 第29页 |
PCR检测阳性克隆 | 第29-30页 |
拟南芥的生长 | 第30-31页 |
拟南芥浸润法转基因系统的建立 | 第31-32页 |
拟南芥转基因植株GUS染色分析与观察 | 第32-33页 |
35S::AtSPX1::GFP载体构建 | 第33页 |
基因枪轰击洋葱表皮细胞及GFP荧光观察 | 第33-34页 |
3 实验结果 | 第34-38页 |
RT-PCR分析AtSPX1基因表达部位 | 第34-35页 |
拟南芥转基因苗的GUS染色及结果分析 | 第35-37页 |
AtSPX1的亚细胞定位结果分析 | 第37-38页 |
三、AtSPX1基因的转基因功能研究 | 第38-45页 |
1 实验材料 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-42页 |
RNA提取 | 第38-39页 |
cDNA第一链的合成 | 第39页 |
AtSPX1超表达载体的构建 | 第39-40页 |
拟南芥转基因 | 第40页 |
表型试验 | 第40-41页 |
磷和铁信号途径相关基因的表达分析 | 第41-42页 |
3 实验结果 | 第42-45页 |
AtSPX1超表达转基因材料与突变体的表型分析 | 第42-43页 |
磷和铁信号途径相关基因的表达分析 | 第43-45页 |
第三部分 讨论 | 第45-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |