第一章 文献综述 | 第1-26页 |
1 转录因子类型与功能 | 第12-16页 |
概述 | 第12页 |
·转录因子的结构特征 | 第12-16页 |
·DNA 结合结构域(DNA -binding domain DB) | 第13页 |
·转录调控区(transcription regulation domain ) | 第13-14页 |
·核定位信号区(nuclear localization signal, NLS) | 第14-15页 |
·寡聚化位点(oligomerization site) | 第15-16页 |
2 转录因子基因的演化 | 第16-17页 |
3. 转录因子的活性调节 | 第17-19页 |
·顺式作用元件的调节 | 第17-18页 |
·mRNA 选择性剪辑对植物转录因子基因的调节作用 | 第18页 |
·上游开放阅读框对翻译的抑制作用 | 第18页 |
·翻译后的修饰 | 第18页 |
·细胞核定位的影响 | 第18-19页 |
·寡聚化的影响 | 第19页 |
4.W RKY 转录因子家族 | 第19-24页 |
·WRKY 的起源 | 第19-20页 |
·WRKY 蛋白的结构 | 第20-21页 |
·WRKY 蛋白和W-box | 第21-22页 |
·W-box | 第21-22页 |
·WRKY 蛋白与W-box 的结合 | 第22页 |
·WRKY 基因的生物学功能 | 第22-24页 |
·WRKY 基因的表达模式 | 第22页 |
·WRKY 基因在防御信号传导中的作用 | 第22-23页 |
·WRKY 基因在发育中的作用 | 第23页 |
·植物体内WRKY 基因的其它功能 | 第23-24页 |
立题意义和实验设计 | 第24-26页 |
第二章 BcWRKY1 基因cDNA 全长与基因全长的克隆、序列分析 | 第26-40页 |
1. 材料与方法 | 第26-32页 |
·材料 | 第26页 |
·生物材料 | 第26页 |
·生化试剂 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-32页 |
·BcWRKY1 特异片段的获得 | 第26-29页 |
·植物总RNA 提取方法 | 第26-27页 |
·RT-PCR | 第27页 |
·PCR | 第27页 |
·质粒酶切反应 | 第27-28页 |
·DNA 片段回收 | 第28页 |
·连接反应 | 第28-29页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第29页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第29页 |
·BcWRKY1 cDNA,基因全长的克隆 | 第29-31页 |
·GlassMAX 纯化cDNA | 第30页 |
·cDNA 加尾 | 第30页 |
·加尾cDNA PCR 扩增 | 第30-31页 |
·巢式PCR | 第31页 |
·CaC12法小量制备感受态细胞 | 第31页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第31页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
·植物总DNA 的提取 | 第32页 |
·BcWRKY1 序列分析 | 第32页 |
2 实验结果 | 第32-40页 |
·特异WRKY 转录因片段的获得 | 第32-33页 |
·BcWRKY1 全长cDNA 和基因全长的克隆 | 第33-34页 |
·序列分析与进化分析 | 第34-40页 |
第三章 BcWRKY1 基因的表达特性分析 | 第40-45页 |
1 材料与方法 | 第40-43页 |
·材料 | 第40页 |
·生物材料 | 第40页 |
·分子生物学试剂 | 第40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·探针的标记 | 第40页 |
·植物胁迫处理 | 第40-41页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第41页 |
·Northern 印迹分析 | 第41-42页 |
·RNA 甲醛琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
·变性RNA 转移 | 第41-42页 |
·杂交 | 第42页 |
·洗膜与检测 | 第42页 |
·Southern 印迹分析 | 第42-43页 |
·酶切及电泳 | 第42-43页 |
·转膜及固定 | 第43页 |
·洗膜、显色 | 第43页 |
2 实验结果 | 第43-45页 |
·BcWRKY1 基因的Northern 检测 | 第43-44页 |
·BcWRKY1 在低温、高盐、干旱胁迫下的诱导表达 | 第43页 |
·BcWRKY1 在SA 、JA、MeJA、ABA 等信号分子诱导表达 | 第43-44页 |
·BcWRKY1 基因Southern 检测 | 第44-45页 |
第四章 单、双子叶植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
1 材料与方法 | 第45页 |
2. 方法 | 第45-46页 |
·双子叶植物双元表达载体构建 | 第45页 |
·单子叶植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
3. 实验结果 | 第46-47页 |
第五章 讨论 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
附录 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致 谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
导师评阅表 | 第60页 |