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厚叶旋蒴苣苔(Boea crassifolia)BcWRKY1转录因子基因克隆及其初步功能分析

第一章 文献综述第1-26页
 1 转录因子类型与功能第12-16页
  概述第12页
   ·转录因子的结构特征第12-16页
     ·DNA 结合结构域(DNA -binding domain DB)第13页
     ·转录调控区(transcription regulation domain )第13-14页
     ·核定位信号区(nuclear localization signal, NLS)第14-15页
     ·寡聚化位点(oligomerization site)第15-16页
 2 转录因子基因的演化第16-17页
 3. 转录因子的活性调节第17-19页
   ·顺式作用元件的调节第17-18页
   ·mRNA 选择性剪辑对植物转录因子基因的调节作用第18页
   ·上游开放阅读框对翻译的抑制作用第18页
   ·翻译后的修饰第18页
   ·细胞核定位的影响第18-19页
   ·寡聚化的影响第19页
 4.W RKY 转录因子家族第19-24页
   ·WRKY 的起源第19-20页
   ·WRKY 蛋白的结构第20-21页
   ·WRKY 蛋白和W-box第21-22页
     ·W-box第21-22页
     ·WRKY 蛋白与W-box 的结合第22页
   ·WRKY 基因的生物学功能第22-24页
     ·WRKY 基因的表达模式第22页
     ·WRKY 基因在防御信号传导中的作用第22-23页
     ·WRKY 基因在发育中的作用第23页
     ·植物体内WRKY 基因的其它功能第23-24页
 立题意义和实验设计第24-26页
第二章 BcWRKY1 基因cDNA 全长与基因全长的克隆、序列分析第26-40页
 1. 材料与方法第26-32页
   ·材料第26页
     ·生物材料第26页
     ·生化试剂第26页
   ·实验方法第26-32页
     ·BcWRKY1 特异片段的获得第26-29页
       ·植物总RNA 提取方法第26-27页
       ·RT-PCR第27页
       ·PCR第27页
       ·质粒酶切反应第27-28页
       ·DNA 片段回收第28页
       ·连接反应第28-29页
       ·连接产物转化大肠杆菌第29页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第29页
     ·BcWRKY1 cDNA,基因全长的克隆第29-31页
       ·GlassMAX 纯化cDNA第30页
       ·cDNA 加尾第30页
       ·加尾cDNA PCR 扩增第30-31页
       ·巢式PCR第31页
     ·CaC12法小量制备感受态细胞第31页
     ·连接产物转化大肠杆菌第31页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第31-32页
     ·植物总DNA 的提取第32页
     ·BcWRKY1 序列分析第32页
 2 实验结果第32-40页
   ·特异WRKY 转录因片段的获得第32-33页
   ·BcWRKY1 全长cDNA 和基因全长的克隆第33-34页
   ·序列分析与进化分析第34-40页
第三章 BcWRKY1 基因的表达特性分析第40-45页
 1 材料与方法第40-43页
   ·材料第40页
     ·生物材料第40页
     ·分子生物学试剂第40页
   ·方法第40-43页
     ·探针的标记第40页
     ·植物胁迫处理第40-41页
     ·植物基因组DNA的提取第41页
     ·Northern 印迹分析第41-42页
       ·RNA 甲醛琼脂糖凝胶电泳第41页
       ·变性RNA 转移第41-42页
       ·杂交第42页
       ·洗膜与检测第42页
     ·Southern 印迹分析第42-43页
       ·酶切及电泳第42-43页
       ·转膜及固定第43页
       ·洗膜、显色第43页
 2 实验结果第43-45页
   ·BcWRKY1 基因的Northern 检测第43-44页
     ·BcWRKY1 在低温、高盐、干旱胁迫下的诱导表达第43页
     ·BcWRKY1 在SA 、JA、MeJA、ABA 等信号分子诱导表达第43-44页
   ·BcWRKY1 基因Southern 检测第44-45页
第四章 单、双子叶植物表达载体的构建第45-47页
 1 材料与方法第45页
 2. 方法第45-46页
   ·双子叶植物双元表达载体构建第45页
   ·单子叶植物表达载体的构建第45-46页
 3. 实验结果第46-47页
第五章 讨论第47-48页
结论第48-49页
附录第49-51页
参考文献第51-58页
致 谢第58-59页
作者简介第59-60页
导师评阅表第60页

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