| 第一部分 文献综述 | 第1-45页 |
| 第一章 新孢子虫的研究概况 | 第12-24页 |
| 1 病原及分类地位 | 第12-13页 |
| 2 新孢子虫病的诊断方法 | 第13-16页 |
| 2．1 虫体分离和体外培养 | 第13页 |
| 2．2 动物接种试验 | 第13页 |
| 2．3 电镜技术 | 第13-14页 |
| 2．4 血清学诊断方法 | 第14-15页 |
| 2．5 聚合酶链式反应(PCR) | 第15-16页 |
| 2．6 结束语 | 第16页 |
| 3 免疫学研究 | 第16-20页 |
| 3．1 抗原 | 第16-18页 |
| 3．1．1 表面抗原 | 第16-18页 |
| 3．2 免疫机制 | 第18-20页 |
| 4 疫苗研究 | 第20-24页 |
| 4．1 免疫预防的应用前景 | 第20-21页 |
| 4．2 活疫苗与死疫苗 | 第21页 |
| 4．3 疫苗设计 | 第21-22页 |
| 4．4 牛新孢子虫病疫苗的应用研究 | 第22-24页 |
| 第二章 脂质体及应用 | 第24-36页 |
| 1 脂质体的组成 | 第24页 |
| 2 脂质体的种类 | 第24-27页 |
| 2．1 pH敏感脂质体 | 第24-25页 |
| 2．2 温度敏感脂质体 | 第25页 |
| 2．3 长循环脂质体 | 第25页 |
| 2．4 免疫脂质体 | 第25-26页 |
| 2．5 磁性脂质体 | 第26页 |
| 2．6 前体脂质体 | 第26页 |
| 2．7 柔性脂质体 | 第26-27页 |
| 2．8 含醇脂质体 | 第27页 |
| 2．9 光敏感脂质体 | 第27页 |
| 2．10 声振波敏感脂质体 | 第27页 |
| 3 脂质体的制备方法 | 第27-29页 |
| 3．1 薄膜分散法 | 第27页 |
| 3．2 超声波分散法 | 第27页 |
| 3．3 表面活性剂处理法 | 第27-28页 |
| 3．4 冷冻干燥法 | 第28页 |
| 3．5 复乳法 | 第28页 |
| 3．6 熔融法 | 第28页 |
| 3．7 逆相蒸发法 | 第28页 |
| 3．8 乙醇注入法 | 第28页 |
| 3．9 乙醚注入法 | 第28-29页 |
| 4 脂质体的作用特点 | 第29页 |
| 4．1 靶向性 | 第29页 |
| 4．2 淋巴定向性 | 第29页 |
| 4．3 缓释性 | 第29页 |
| 4．4 可以降低药物的毒性 | 第29页 |
| 4．5 细胞亲和性与组织相容性 | 第29页 |
| 5 脂质体的应用 | 第29-34页 |
| 5．1 脂质体作为基因的传递载体 | 第29-31页 |
| 5．2 脂质体用做药物的载体 | 第31-32页 |
| 5．3 脂质体作为免疫佐剂 | 第32-33页 |
| 5．4 在诊断中的应用 | 第33-34页 |
| 5．5 在营养上的应用 | 第34页 |
| 6 提高脂质体稳定性的措施 | 第34-36页 |
| 6．1 改进制备工艺提高脂质体的稳定性 | 第34-35页 |
| 6．2 提高脂质体双分子膜在血液循环中的稳定性 | 第35-36页 |
| 第三章 DNA疫苗的优化措施 | 第36-45页 |
| 1 优化核酸免疫载体 | 第36-37页 |
| 1．1 真核表达载体外源基因调节元件的优化 | 第36页 |
| 1．2 载体自身免疫刺激序列的优化 | 第36-37页 |
| 1．3 核酸免疫载体中引入甲病毒复制子 | 第37页 |
| 2 优化保护性抗原编码序列 | 第37页 |
| 3 筛选合适的免疫佐剂 | 第37-43页 |
| 3．1 细胞因子 | 第37-40页 |
| 3．2 协同信号分子 | 第40-41页 |
| 3．3 补体C3d分子 | 第41页 |
| 3．4 热休克蛋白70(hsp70) | 第41页 |
| 3．5 Flt3配体(FL) | 第41-42页 |
| 3．6 LAMP-1(溶酶体相关膜蛋白-1) | 第42页 |
| 3．7 化学因子 | 第42-43页 |
| 4 选择合适的接种途径 | 第43页 |
| 5 DNA疫苗的安全性评价 | 第43-44页 |
| 6 改进分离纯化工艺 | 第44-45页 |
| 第二部分 新孢子虫NCSRS2基因真核表达质粒的构建 | 第45-55页 |
| 2．1 材料与方法 | 第45-51页 |
| 2．1．1 试验材料与试剂配制 | 第45-47页 |
| 2．1．2 方法 | 第47-51页 |
| 2．2 结果与分析 | 第51-53页 |
| 2．2．1 NcSRS2基因真核表达质粒的构建 | 第51-52页 |
| 2．2．2 目的基因的测序鉴定 | 第52-53页 |
| 2．3 讨论 | 第53-55页 |
| 第三部分 新孢子虫NCSRS2基因在VERO细胞中的表达 | 第55-67页 |
| 3．1 材料与方法 | 第55-63页 |
| 3．1．1 试验材料与试剂配制 | 第55-58页 |
| 3．1．2 方法 | 第58-63页 |
| 3．2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 3．2．1 新孢子虫表面蛋白NcSRS2多克隆抗体的制备 | 第63页 |
| 3．2．2 质粒PcNcSRS2与脂质体的最佳比例的确定 | 第63-64页 |
| 3．2．3 RT-PCR检测重组质粒在Vero细胞中的表达 | 第64页 |
| 3．2．4 western blot检测基因转染细胞NcSRS2蛋白的表达 | 第64-65页 |
| 3．3 讨论 | 第65-67页 |
| 第四部分 新孢子虫NCSRS2 DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答 | 第67-79页 |
| 4．1 材料与方法 | 第67-74页 |
| 4．1．1 试验材料与试剂配制 | 第67-69页 |
| 4．1．2 方法 | 第69-74页 |
| 4．2 结果 | 第74-76页 |
| 4．2．1 小鼠血清抗体效价 | 第74页 |
| 4．2．2 核酸疫苗pcNcSRS2对小鼠淋巴细胞转化功能的影响 | 第74-75页 |
| 4．2．3 小鼠血浆中NO的浓度 | 第75页 |
| 4．2．4 半定量RT-PCR结果 | 第75-76页 |
| 4．3 讨论 | 第76-79页 |
| 第五部分 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
