| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-25页 |
| 1 无乳链球菌的特征 | 第15-19页 |
| ·无乳链球菌的分类地位和生化特性 | 第15页 |
| ·无乳链球菌对于鱼类的致病性 | 第15页 |
| ·无乳链球菌的检测及鉴定 | 第15-17页 |
| ·无乳链球菌表面蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| 2 链球菌病对鱼类的危害 | 第19-21页 |
| 3 鱼用疫苗研究现状 | 第21-23页 |
| ·常规疫苗 | 第21-22页 |
| ·基因工程疫苗 | 第22-23页 |
| 4 鱼类链球菌疫苗的免疫预防研究 | 第23-24页 |
| 5 本研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第一章 无乳链球菌的分离、鉴定及药敏试验分析 | 第25-41页 |
| 1 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·患病罗非鱼和实验动物 | 第25页 |
| ·克隆质粒和菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| 2 结果 | 第32-38页 |
| ·病原菌人工感染 | 第32-34页 |
| ·病鱼组织除菌液人工感染实验 | 第34页 |
| ·病原菌与菌落形态 | 第34页 |
| ·生理生化特性 | 第34-36页 |
| ·16SrRNA 与cfb 基因及系统发育分析 | 第36-37页 |
| ·药敏试验 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| 第二章 双重PCR 快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌 | 第41-46页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-44页 |
| ·双重PCR 检测无乳链球菌和海豚链球菌的特异性 | 第42-43页 |
| ·双重PCR 检测无乳链球菌和海豚链球菌的敏感性 | 第43-44页 |
| ·临床样品的双重PCR 检测结果 | 第44页 |
| 3 结果与讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 无乳链球菌分离株分子血清型的分析 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·菌株及载体 | 第46页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第46页 |
| ·分子分型（Molecular serotyping） | 第46-47页 |
| ·多位点序列分型（multi-locus sequence typing ,MLST） | 第47-48页 |
| 2 结果 | 第48-50页 |
| ·无乳链球菌血清型分析 | 第48-49页 |
| ·无乳链球菌序列多态性分析 | 第49-50页 |
| 3 结果与讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 无乳链球菌表面免疫原性蛋白Sip 基因的克隆、表达及免疫原性分析 | 第52-69页 |
| 1 材料和方法 | 第52-62页 |
| ·质粒和菌种及实验动物 | 第52-53页 |
| ·酶和试剂 | 第53页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第53-55页 |
| ·方法 | 第55-62页 |
| 2 结果 | 第62-67页 |
| ·Sip 基因的扩增，克隆测序产物 | 第62页 |
| ·基因Sip 的PCR 鉴定与测序 | 第62-63页 |
| ·Sip 基因的抗原性分析 | 第63-64页 |
| ·重组白诱导表达、SDS–PAGE 分析与纯化 | 第64-65页 |
| ·免疫印记分析 | 第65页 |
| ·外膜蛋白Sip 对罗非鱼的免疫保护作用 | 第65-66页 |
| ·Elisa 检测罗非鱼血清抗体 | 第66页 |
| ·灭活疫苗对罗非鱼的免疫保护作用 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 全文总结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 附录A 缩略词表 | 第79-80页 |
| 附录B 表达质粒pCodII 载体图谱 | 第80-81页 |
| 附录C 在读期间参与发表的文章及学术交流 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
