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柑橘体细胞杂种细胞遗传学及抗CTV等基因对枳的FISH分析

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-16页
第一章 文献综述与本研究的目的第16-35页
 1 植物体细胞杂交的研究进展第16-21页
   ·植物体细胞杂交研究概况第16页
   ·植物体细胞杂种鉴定方法的发展第16-19页
     ·形态学鉴定第17页
     ·细胞学鉴定第17页
     ·生物化学方法分析第17-18页
     ·分子生物学检测第18-19页
   ·柑橘体细胞杂交的研究进展第19-21页
     ·柑橘体细胞杂种的遗传分析第19-20页
     ·柑橘体细胞杂种的表现及其在遗传改良上的应用第20-21页
 2 植物染色体原位杂交技术的研究进展第21-30页
   ·原位杂交技术概述第21-22页
   ·植物染色体原位杂交技术的发展及应用第22-30页
     ·植物染色体原位杂交技术的发展第22-24页
       ·染色体制片技术的发展第22-23页
       ·探针及其标记检测系统的发展第23-24页
       ·与其它技术的结合第24页
     ·染色体原位杂交技术在植物上的应用第24-26页
       ·外源染色质(体)、多种染色体畸变的检测第24页
       ·在构建植物染色体物理图谱上的应用第24-25页
       ·物种起源进化及物种间亲缘关系的分析第25页
       ·植物基因工程及基因表达研究第25-26页
       ·比较基因组分析第26页
     ·染色体原位杂交技术与植物体细胞杂种遗传鉴定第26-29页
       ·倍性变异来源检测第26-27页
       ·非对称程度确认第27页
       ·亲核基因组互作第27-28页
       ·减数分裂时期染色体行为第28-29页
       ·融合双亲染色体在有性后代中的传递第29页
     ·FISH在基因的物理定位上的应用第29-30页
 3 柑橘细胞遗传学研究进展第30-32页
 4 柑橘抗CTV基因的研究进展第32-33页
 5 本研究的目的与内容第33-35页
第二章 柑橘体细胞杂种及其亲本的细胞遗传学研究第35-55页
 1 前言第35页
 2 材料与方法第35-39页
   ·实验材料第35-37页
     ·本研究所选用的柑橘体细胞杂种第35页
     ·SSR分析所使用的引物第35-37页
   ·方法第37-39页
     ·倍性分析第37页
     ·花粉母细胞的减数分裂观察第37-38页
     ·花粉的育性检测第38页
       ·花粉量测定第38页
       ·花粉染色活力第38页
       ·花粉萌发第38页
     ·总DNA提取第38-39页
     ·SSR分析第39页
 3 结果与分析第39-51页
   ·形态学观察第39-40页
   ·倍性确定第40-42页
   ·偑奇橘柚与粗柠檬组合再生植株的鉴定SSR分析核基因组第42-43页
   ·柑橘体细胞杂种及其亲本减数分裂时期染色体行为分析第43-45页
     ·减数分裂中期花粉母细胞的染色体联会构型情况第43-44页
       ·二倍体亲本减数分裂中期染色体的配对情况第43页
       ·体细胞杂种组合减数分裂中期染色体的配对情况第43-44页
     ·减数分裂过程中染色体的异常行为第44-45页
       ·二倍体亲本减数分裂过程中染色体的异常行为第44-45页
       ·体细胞杂种组合减数分裂过程中染色体的异常行为第45页
   ·柑橘体细胞杂种及其亲本的花粉育性第45-51页
     ·亲本的花粉育性第48页
     ·柑橘体细胞杂种的花粉育性第48-51页
 4 讨论第51-55页
   ·柑橘体细胞杂种在减数分裂过程中发生染色体异常行为的原因第51-52页
   ·柑橘体细胞杂种的花粉育性与其亲本比较第52-53页
   ·柑橘体细胞杂种的育性与遗传改良第53-55页
第三章 柑橘属间杂种的GISH分析第55-69页
 1 前言第55页
 2 材料与方法第55-59页
   ·实验材料第55-56页
   ·方法第56-59页
     ·染色体片制备第56页
     ·总DNA提取第56页
     ·探针标记第56-58页
     ·杂交和检测第58页
     ·照相和图像分析第58-59页
 3 结果与分析第59-63页
   ·GISH技术体系的建立第59-61页
     ·去壁低渗-火焰干燥法染色体制片第59页
     ·打断封阻总DNA方法第59-60页
     ·探针标记的方法第60-61页
     ·标记基因组总DNA与封阻基因组总DNA浓度比例确定第61页
     ·染色体复染第61页
   ·应用GISH鉴定柑橘属间有性杂种枳橙和枳柚第61-62页
   ·基因组原位杂交比较枳与甜橙的基因组同源性第62页
   ·GISH分析体细胞杂种枸头橙+枳核基因组第62-63页
   ·GISH确定3个柑橘属间组合的杂种地位第63页
 4 讨论第63-69页
   ·提高制片技术扩展染色体的来源第63页
   ·GISH技术方法第63-64页
   ·GISH技术在柑橘上的应用前景第64-65页
   ·枳和橙以及枳和柚的亲缘关系讨论第65-66页
   ·柑橘体细胞杂种的染色体重组现象第66页
   ·CISH技术分析柑橘体细胞杂种的应用潜力第66-69页
第四章 抗CTV及其它几个基因在枳中的FISH作图第69-88页
 1 前言第69页
 2 材料与方法第69-74页
   ·实验材料第69页
   ·方法第69-74页
     ·总DNA提取第69-70页
     ·Cot—1 DNA提取第70页
     ·探针制备第70-73页
       ·抗CTV基因探针制备第70-71页
         ·质粒DNA提取第70-71页
         ·PCR检测第71页
       ·rDNA基因探针制备第71页
       ·反转录转座子copia-like基因探针制备第71页
       ·PG基因探针制备第71-73页
         ·引物设计第71-72页
         ·PCR扩增第72页
         ·特异带的回收第72页
         ·PCR产物的TA克隆、测序与序列分析第72-73页
     ·随机引物法标记探针第73页
     ·原位杂交和检测,照相及图像分析第73页
     ·Southern杂交第73-74页
       ·DNA酶切与电泳分离第73页
       ·Southern印迹第73-74页
       ·探针标记、杂交与洗膜第74页
 3 结果与分析第74-84页
   ·Cot—1 DNA对枳染色体的原位杂交分析第74-75页
     ·Cot—1 DNA的获得第74-75页
     ·Cot—1 DNA对枳染色体的FISH分析第75页
   ·抗CTV基因在枳染色体上的物理定位第75-78页
     ·含抗CTV基因的TAC、BAC克隆在枳中的FISH定位第75-76页
     ·pt-8在枳中的FISH定位第76-78页
   ·rDNA基因的FISH分析第78-79页
   ·反转录转座子copia-like基因的FISH分析第79页
   ·PG基因的克隆及定位第79-84页
     ·PG基因的分离与克隆第79-83页
     ·PG基因的染色体物理定位第83-84页
 4 讨论第84-88页
   ·TAC、BAC克隆与单拷贝基因分别用作探针对FISH定位基因的比较第84-85页
   ·rDNA基因在柑橘基因组上的分布第85页
   ·反转录转座子copia-like基因的定位第85-86页
   ·PG基因的定位第86-87页
   ·FISH定位基因在柑橘作物上的局限性第87-88页
参考文献第88-105页
图版和说明第105-138页
致谢第138-139页
攻读博士学位期间发表论文第139页

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