| 前言 | 第1-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 木糖发酵 | 第11-13页 |
| ·燃料酒精 | 第11页 |
| ·植物纤维原料 | 第11-12页 |
| ·木糖代谢途径 | 第12-13页 |
| ·菌种选育 | 第13页 |
| 2 树干毕赤酵母 | 第13-15页 |
| ·遗传基因研究 | 第13-14页 |
| ·基因改良 | 第14-15页 |
| 3 cDNA 文库 | 第15-20页 |
| ·基因组文库与cDNA文库 | 第15-16页 |
| ·cDNA文库的载体系统 | 第16-17页 |
| ·cDNA文库构建方法进展 | 第17-19页 |
| ·差减cDNA 文库 | 第17-18页 |
| ·标准化cDNA 文库 | 第18页 |
| ·标准化cDNA 差减文库 | 第18页 |
| ·cDNA PCR文库与RACE cDNA 文库 | 第18-19页 |
| ·cDNA 文库的质量 | 第19页 |
| ·cDNA 文库的应用 | 第19-20页 |
| ·筛选与性状相关的重要基因 | 第20页 |
| ·结合芯片技术对生物体基因的时空表达进行研究 | 第20页 |
| ·为EST的开发提供材料 | 第20页 |
| 4 EST技术及其应用 | 第20-24页 |
| ·EST技术 | 第20-21页 |
| ·EST技术的应用 | 第21-22页 |
| ·构建遗传学图谱 | 第21页 |
| ·分离与鉴定新基因 | 第21-22页 |
| ·基因差异表达的研究 | 第22页 |
| ·用于制备DNA 芯片 | 第22页 |
| ·酵母基因组计划与EST | 第22-24页 |
| 第二章 树干毕赤酵母 RNA提取 | 第24-35页 |
| 1 基本原理 | 第24页 |
| 2 试剂及实验准备 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·实验准备 | 第24页 |
| 3 检测方法 | 第24-25页 |
| 4 菌种及细胞培养 | 第25页 |
| 5 操作步骤 | 第25-26页 |
| ·以TRIZOL 试剂提取RNA | 第25页 |
| ·用变性裂解液提取RNA | 第25-26页 |
| 6 结果与讨论 | 第26-34页 |
| ·不同菌株的RNA 提取 | 第26-28页 |
| ·不同方法提取RNA | 第28-31页 |
| ·匀浆法 | 第28-29页 |
| ·玻砂法 | 第29-30页 |
| ·液氮法 | 第30-31页 |
| ·液氮速冻加液氮研磨 | 第31页 |
| ·试剂选择 | 第31-32页 |
| ·比例放大 | 第32-34页 |
| 7 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 树干毕赤酵母cDNA 文库构建 | 第35-52页 |
| 1 基本原理 | 第35页 |
| 2 实验试剂 | 第35页 |
| 3 检测方法 | 第35-36页 |
| 4 实验材料 | 第36页 |
| 5 操作步骤 | 第36-41页 |
| ·mRNA分离与纯化 | 第36-37页 |
| ·冲冼链霉亲和素磁珠 | 第36页 |
| ·探针退火 | 第36页 |
| ·捕获并清洗已退火的Oligo (dT)-m RNA杂合体 | 第36页 |
| ·mRNA的洗脱 | 第36页 |
| ·浓缩mRNA | 第36-37页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第37页 |
| ·第二链cDNA 的合成 | 第37页 |
| ·cDNA 末端的补平 | 第37-38页 |
| ·EcoR I 接头的连接 | 第38页 |
| ·EcoR I 末端磷酸化 | 第38页 |
| ·用Xho I 消化 | 第38页 |
| ·cDNA 大小片段筛选 | 第38-39页 |
| ·cDNA 与质粒载体相连 | 第39页 |
| ·连接产物纯化 | 第39页 |
| ·转化宿主菌 | 第39页 |
| ·文库库滴度测定 | 第39-40页 |
| ·插入片段大小检测 | 第40页 |
| ·文库扩增 | 第40-41页 |
| 6 结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·mRNA纯化 | 第41-42页 |
| ·cDNA 双链合成 | 第42-44页 |
| ·cDNA 片段大小筛选 | 第44-46页 |
| ·cDNA 文库滴度测定 | 第46-50页 |
| ·初级文库滴度 | 第47-48页 |
| ·扩增文库总克隆数测定 | 第48-50页 |
| ·插入片段大小检测 | 第50-51页 |
| 7 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 EST 序列测定及后期设想 | 第52-67页 |
| 1 EST序列测定 | 第52-65页 |
| ·基本原理 | 第52页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第52页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·操作步骤 | 第52-55页 |
| ·铺布蓝白斑平板 | 第53页 |
| ·大规模质粒提取 | 第53-54页 |
| ·大规模质粒测序PCR反应 | 第54页 |
| ·大规模测序PCR反应产物纯化 | 第54-55页 |
| ·测序样品上机运行 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-65页 |
| ·质粒提取 | 第55-56页 |
| ·大规模EST序列获得 | 第56-65页 |
| 2 后期设想 | 第65-66页 |
| ·EST数据分析 | 第65-66页 |
| ·连续重叠群与EST的聚类 | 第65页 |
| ·EST与数据库同源性比较 | 第65-66页 |
| ·DNA 芯片制备 | 第66页 |
| 3 小结 | 第66-67页 |
| 第五章 总结 | 第67-69页 |
| 1 RNA 提取 | 第67页 |
| 2 cDNA 文库构建 | 第67页 |
| 3 EST序列测定 | 第67-68页 |
| 4 cDNA 文库及EST应用 | 第68页 |
| 5 几点创新 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 详 细 摘 要 | 第73-76页 |