| 第一章 综述 | 第1-19页 |
| 1 引言 | 第9-10页 |
| 2 文献综述 | 第10-16页 |
| ·基因转化受体系统的建立 | 第10-12页 |
| ·基因转化方法及研究现状 | 第12-15页 |
| ·转化所使用的报告基因及选择标记 | 第15页 |
| ·牧草抗非生物胁迫基因工程研究现状 | 第15-16页 |
| 3 CBF 转录因子概况 | 第16-17页 |
| 4 牧草基因工程存在的问题与展望 | 第17-18页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 冰草组织培养再生体系 | 第19-33页 |
| 1. 以幼穗为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立 | 第19-25页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-25页 |
| 2 以成熟胚为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立 | 第25-28页 |
| ·材料与方法 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-28页 |
| 3 讨论 | 第28-33页 |
| ·外植体 | 第28-29页 |
| ·基因型对冰草组织培养再生的影响 | 第29-30页 |
| ·外源激素在组织培养中的作用 | 第30-33页 |
| 第三章 HpBPC-CBF表达载体构建 | 第33-44页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·中间载体 SK-CBF的构建和检测 | 第39-41页 |
| ·HpBPC-CBF的构建和检测 | 第41-42页 |
| 3. 讨论 | 第42-44页 |
| ·目的基因 CBF | 第42页 |
| ·启动子的选择 | 第42-44页 |
| 第四章 基因枪轰击法获得转 CBF基因的冰草植株 | 第44-56页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·受体材料 | 第44页 |
| ·转化所用的重组质粒 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·仪器设备 | 第44页 |
| ·培养基的名称及配方 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-49页 |
| ·冰草愈伤组织对选择剂Glufosinate 抗性的测定 | 第45页 |
| ·冰草基因枪法转化 | 第45-49页 |
| ·转化体筛选和植株再生 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·愈伤组织对除草剂的敏感性测定 | 第49-50页 |
| ·基因枪转化后的愈伤抗性筛选、分化及再生 | 第50-52页 |
| ·基因枪转化中条件的优化 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| ·受体材料的选择 | 第53页 |
| ·高渗处理对转化的影响 | 第53-54页 |
| ·基因枪转化影响因素 | 第54-55页 |
| ·恢复培养对转化效率的影响 | 第55页 |
| ·共转化 | 第55-56页 |
| 第五章 转基因冰草的检测 | 第56-63页 |
| 1 转CBF4基因冰草植株的分子检测 | 第56-59页 |
| ·PCR 检测 | 第56-58页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-61页 |
| ·转基因植株的 PCR 检测 | 第59-60页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第60-61页 |
| ·基因枪转化冰草的频率 | 第61页 |
| 3. 讨论 | 第61-63页 |
| ·分子标记 | 第61页 |
| ·分子杂交 | 第61-63页 |
| 第六章 结论 | 第63-64页 |
| 1 建立了4 种冰草两种外植体的再生体系 | 第63页 |
| 2 构建了植物表达载体HpBPC-CBF4 | 第63页 |
| 3 初步建立了冰草的遗传转化体系 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
