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优质大豆球蛋白Gy7基因克隆及转化烟草的研究

致谢第1-4页
目录第4-7页
第一部分 文献综述 大豆球蛋白研究以及在改良稻米营养品质中的应用第7-19页
 摘要第7-9页
 0 引言第9页
 1 大豆盐溶性球蛋白组分及 11S 大豆球蛋白结构第9-10页
 2 大豆球蛋白基因家族第10-11页
 3 大豆球蛋白的基因结构及碱基同源性分析第11-12页
 4 大豆球蛋白基因的表达调控第12-13页
 5 大豆球蛋白的氨基酸序列组成第13-17页
   ·氨基酸序列比较分析第13-15页
   ·氨基酸组成分析第15-16页
   ·大豆球蛋白的酸性肽和碱性肽重要氨基酸含量分析第16-17页
 6 大豆球蛋白基因在水稻营养品质改良中的应用及展望第17-19页
第二部分 研究论文第19-58页
 第一篇 总蛋白及谷蛋白含量不同的水稻品种 Gt1 启动子克隆和序列比较第19-33页
  摘要第19-21页
  0 引言第21-22页
  1 材料与方法第22-28页
   ·材料第22页
   ·方法第22-28页
     ·提取水稻蛋白质溶液配制第22页
     ·糙米谷蛋白含量分析第22-23页
     ·水稻总 DNA 提取及 Gt1 启动子的分离、克隆及测序第23-28页
  2 结果与分析第28-32页
   ·3种水稻种子谷蛋白含量第28页
   ·Gt1启动子 PCR 扩增及阳性克隆的鉴定第28-29页
   ·扩增产物的序列分析第29-32页
  3 讨论第32-33页
 第二篇 大豆球蛋白 Gy7 基因的克隆及表达载体的构建第33-48页
  摘要第33-35页
  0 引言第35页
  1 材料和方法第35-39页
   ·材料第35-36页
     ·植物材料第35页
     ·试剂、质粒和菌株第35-36页
   ·方法第36-39页
     ·大豆球蛋白Gy7 基因分离、克隆及测序第36-38页
     ·水稻谷蛋白启动子构建到pCAMBIA1300 上第38页
     ·Gy7基因的植物表达载体构建第38-39页
     ·植物表达载体pCAMBIA1300-Gt1-Gy7导入根癌农杆菌第39页
  2 结果与分析第39-47页
   ·Gy7目的基因与pUCm-T载体的连接鉴定第39-40页
   ·Gy7结构基因测序结果与Genbank(AF319776)序列比对第40-44页
   ·pCAMBIA1300-Gt1阳性克隆的鉴定第44页
   ·pCAMBIA1300-Gt1-Gy7表达载体的PCR鉴定第44-45页
   ·pCAMBIA1300-Gt1-Gy7表达载体的酶切鉴定第45-46页
   ·根癌农杆菌阳性转化子的鉴定结果第46-47页
  3 讨论第47-48页
 第三篇 利用共转化法将大豆球蛋白 Gy7 基因导入烟草的研究第48-58页
  摘要第48-49页
  0 引言第49页
  1 材料与方法第49-53页
   ·实验材料第49-50页
     ·供试烟草品种第49页
     ·菌株、质粒和主要生化试剂第49-50页
   ·方法第50-53页
     ·烟草组织培养培养基配制第50页
     ·烟草无菌苗的获得第50-51页
     ·根瘤农杆菌介导的烟草遗传转化及转基因植株的获得第51-52页
     ·T_0 代烟草植株的 PCR 分析第52-53页
       ·CTAB 法大量抽提烟草植株叶片的总 DNA第52页
       ·琼脂糖凝胶电泳第52页
       ·潮霉素抗性转基因植株的 PCR 分析第52页
       ·共转化植株的筛选第52-53页
  2 结果与分析第53-56页
   ·烟草叶片与农杆菌的共培养第53页
   ·烟草叶片愈伤组织的诱导、筛选和分化第53-54页
   ·PCR 检测结果第54-56页
  3 讨论第56-58页
参考文献第58-63页
中英文对照第63-64页
论文作者声明第64-65页

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