1、前言 | 第1-18页 |
1.1 禽传染性支气管炎的研究概况 | 第7页 |
1.2 大肠杆菌基因工程菌发酵工艺的研究进展 | 第7-12页 |
1.3 质粒DNA提取工艺的研究进展 | 第12-17页 |
1.4 存在的问题 | 第17页 |
1.5 本研究的前期工作基础 | 第17页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2、技术路线 | 第18页 |
3、材料 | 第18-19页 |
3.1 质粒和菌种 | 第18页 |
3.2 培养基及试剂配方 | 第18-19页 |
3.3 主要仪器 | 第19页 |
4、方法 | 第19-25页 |
4.1 测定方法 | 第19-20页 |
4.2 携带 IBV基因重组质粒的大肠杆菌的鉴定 | 第20-21页 |
4.3 携带IBV基因重组质粒的大肠杆菌发酵工艺研究 | 第21-23页 |
4.3.1 摇瓶发酵培养基的筛选 | 第21-22页 |
4.3.2 摇瓶培养条件的筛选 | 第22-23页 |
4.3.3 发酵罐培养 | 第23页 |
4.4 质粒 DNA的提纯工艺研究 | 第23-25页 |
4.4.1 质粒粗提 | 第23-24页 |
4.4.2 质粒纯化 | 第24页 |
4.4.3 纯化质粒 DNA的质量评价 | 第24-25页 |
5、结果及分析 | 第25-37页 |
5.1 携带IBV基因重组质粒的大肠杆菌的鉴定 | 第25页 |
5.2 携带 IBV基因重组质粒的大肠杆菌发酵工艺研究 | 第25-33页 |
5.2.1 摇瓶发酵培养基筛选 | 第25-29页 |
5.2.2 摇瓶培养条件的筛选 | 第29-31页 |
5.2.3 发酵罐培养 | 第31-33页 |
5.3 质粒 DNA的提纯工艺研究 | 第33-37页 |
5.3.1 质粒粗提 | 第33页 |
5.3.2 质粒纯化 | 第33-35页 |
5.3.3 纯化质粒 DNA的质量评价 | 第35-36页 |
5.3.4 纯化后质粒 DNA的成本 | 第36-37页 |
6、讨论 | 第37-41页 |
6.1 携带 IBV基因重组质粒大肠杆菌发酵工艺的研究 | 第37-38页 |
6.1.1 发酵培养基 | 第37页 |
6.1.2 发酵培养条件 | 第37-38页 |
6.1.3 发酵方式 | 第38页 |
6.2 质粒提取工艺的研究 | 第38-41页 |
6.2.1 质粒粗提 | 第38-40页 |
6.2.2 质粒纯化 | 第40-41页 |
7、结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
攻读学位期间发表论文 | 第48页 |