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转rolB基因改良毛白杨生根能力的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
本文缩略词(Abbreviation)第8-12页
1 引言第12-27页
   ·研究的目的意义第12-13页
   ·杨树扦插生根机理的研究现状第13-14页
     ·插条生根的解剖特性第13页
     ·插条生根的生理生化研究第13-14页
   ·杨树生根性状的遗化改良第14-16页
     ·杂交育种第14-15页
     ·遗传转化第15-16页
   ·发根农杆菌Ri质粒rol基因研究进展及在林木改良上的应用第16-25页
     ·Ri质粒与rol基因第16-18页
       ·Ri质粒的结构与功能第16-17页
       ·rol基因的位点与特征第17-18页
     ·Ri质粒或rol基因的转化对植物生长发育的影响第18-23页
       ·对根的形成与生长发育的影响第18-21页
       ·对地上部分的生长发育及形态的影响第21-23页
     ·Ri质粒rol基因在林木及园林植物遗传改良上的应用第23-24页
       ·利用Ri质粒rol基因来促进林木生根与提高植株生长量第23-24页
       ·转化单个rol基因,定向改变林木生长性状第24页
       ·利用rol基因转化植株的变异培育新品种第24页
     ·问题与展望第24-25页
   ·研究的主要内容与技术路线第25-27页
2 植物表达载体pBinGH3rolB的构建第27-41页
   ·材料和方法第27-33页
     ·材料第27-29页
     ·方法第29-33页
   ·结果与分析第33-41页
     ·GH3启动子-rolB-nos-终止子表达框架的测序及酶切位点的确定第33-36页
     ·pUC-GH3-rolB-nos质粒的EcoRⅠ酶切及目的片段回收第36-37页
     ·植物表达载体pBinGH3rolB的构建第37页
     ·重组质粒的酶切鉴定第37-39页
     ·植物表达载体向农杆菌的转化及转化子的鉴定第39-41页
3 毛白杨离体再生系统的建立第41-55页
   ·材料和方法第41-44页
     ·材料第41-42页
     ·试验方法第42-44页
   ·结果与分析第44-51页
     ·外植体不同消毒时间对污染率和存活率的影响第44-45页
     ·诱导叶片不定芽的最佳培养基筛选第45-49页
       ·不同激素组合对叶片再生的影响第45-48页
       ·基本培养基类型对叶片诱导分化的影响第48-49页
     ·不同无性系叶片诱导分化的比较第49-50页
     ·不同外植体类型的再生能力比较第50页
     ·植株不同部位叶片对其再生不定芽的影响第50-51页
   ·讨论第51-55页
4 毛白杨遗传转化体系的建立与优化第55-75页
   ·材料和方法第55-60页
     ·材料第55-57页
     ·方法第57-60页
       ·抗生素对毛白杨外植体分化和试管苗生根的影响第57-58页
       ·遗传转化及筛选第58-59页
       ·转化方法和转化条件的优化第59-60页
   ·结果与分析第60-71页
     ·抗生素对毛白杨外植体分化和试管苗生根的影响第60-64页
       ·叶片不定芽诱导对卡那霉素筛选剂的敏感性第60-61页
       ·卡那霉素对试管苗生根的影响第61-62页
       ·抗菌素对离体叶片冉生频率的影响第62-63页
       ·抗菌素对试管苗生根的影响第63-64页
     ·头孢霉素和羧苄青霉素对农杆菌的抑菌效果第64-65页
     ·转化方法和转化条件的优化第65-70页
       ·预培养对转化效果的影响第65-66页
       ·适宜共培养时间的确定第66-67页
       ·乙酰丁香酮对转化效果的影响第67页
       ·不同侵染时间对转化效果的影响第67-68页
       ·LBA4404和C58C1两种菌株侵染能力的比较第68-69页
       ·选择压力对转化效果的影响第69-70页
     ·转rolB基因Kan抗性植株的获得第70-71页
   ·讨论第71-75页
     ·抗生素种类选择及敏感性测定第71页
     ·预培养的作用第71-72页
     ·Vir基因活化剂乙酰丁香酮的使用第72-73页
     ·转化体的选择第73-74页
     ·农杆菌菌株间侵染能力的差异第74-75页
5 转rolB基因植株的检测及生根能力的研究第75-92页
   ·材料与方法第75-82页
     ·材料第75-76页
     ·方法第76-82页
   ·结果与分析第82-89页
     ·转基因植株叶片再生的卡那霉素抗性鉴定第82页
     ·转rolB基因植株的PCR检测第82-83页
     ·探针标记效率的检测第83-84页
     ·转基因植株的PCR-Southern检测第84-85页
     ·转基因植株的Southern杂交分析第85-86页
     ·rolB-GUS基因表达的组织化学定位分析第86-87页
     ·转化植株离体生根能力的初步研究第87-89页
   ·讨论第89-92页
6 结论第92-94页
参考文献第94-105页
图版第105-111页
个人简历第111-112页
导师简介第112-114页
致谢第114页

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