| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-35页 |
| 1 蓝光反应 | 第17-22页 |
| ·去黄化 (de-etiolation) | 第18-20页 |
| ·植物器官的运动 | 第20-21页 |
| ·色素合成 | 第21页 |
| ·昼夜节律和开花调节 | 第21-22页 |
| 2 蓝光受体 | 第22-29页 |
| ·向光素、PHY3以及玉米黄素 | 第22-24页 |
| ·隐花色素 | 第24-29页 |
| ·隐花色素的结构 | 第25-26页 |
| ·植物隐花色素在细胞中的定位 | 第26-27页 |
| ·隐花色素的磷酸化 | 第27-28页 |
| ·隐花色素的光降解 | 第28-29页 |
| 3.隐花色素下游的信号转导 | 第29-31页 |
| ·质膜离子通道 | 第29页 |
| ·钙信号 | 第29-30页 |
| ·转录因子 | 第30-31页 |
| 4 突变体和空间诱变 | 第31-33页 |
| 5 研究背景及意义 | 第33-35页 |
| 第二章 高粱突变体har1生长和光形态建成的研究 | 第35-60页 |
| 1 引言 | 第35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-38页 |
| ·植物材料 | 第35-36页 |
| ·幼苗的培养 | 第35-36页 |
| ·高粱的大田栽培 | 第36页 |
| ·R111和har1叶片叶绿体超微结构观察 | 第36页 |
| ·测定方法 | 第36-38页 |
| ·花色素苷含量测定 | 第36-37页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第37页 |
| ·叶面积的测量 | 第37页 |
| ·外施GA_3对高梁突变体har1幼苗生长的影响 | 第37-38页 |
| ·光源 | 第38页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·高粱野生型R111和突变体har1节间长度的比较 | 第38-39页 |
| ·蓝光对R111和har1幼苗生长的影响 | 第39-45页 |
| ·外施GA_3对突变体har1幼苗不同器官生长的影响 | 第45-49页 |
| ·光质对R111和har1幼苗中胚轴花色素苷积累的影响 | 第49-51页 |
| ·光质对R111和har1幼苗叶绿素含量的影响 | 第51-56页 |
| ·蓝光下R111和har1叶片叶绿体的发育 | 第56-58页 |
| 4.讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 高粱野生型R111和突变体har1隐花色素2基因的克隆及序列分析 | 第60-77页 |
| 1 引言 | 第60页 |
| 2 材料和方法 | 第60-66页 |
| ·材料和试剂 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·主要试剂和酶 | 第61页 |
| ·溶液配制 | 第61-62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-66页 |
| ·总RNA的提取 | 第62页 |
| ·反转录RT系统的建立 | 第62-63页 |
| ·高粱野生型R111和突变体har1 CRY2基因特异片段的获得 | 第63页 |
| ·cDNA的3′末端的快速扩增方法(3′RACE) | 第63-64页 |
| ·PCR产物的回收 | 第64页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第64页 |
| ·PCR产物与T-Vector连接、鉴定及转化E. coli XL-blue感受态细胞 | 第64页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第64-65页 |
| ·DNA序列分析 | 第65页 |
| ·高粱突变体har1隐花色素基因cDNA的克隆 | 第65页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第65-66页 |
| ·高粱野生型R111和突变体har1基因组DNA的克隆 | 第66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-75页 |
| ·高粱总RNA的提取 | 第66页 |
| ·特异片段的获得 | 第66-67页 |
| ·cDNA的3’末端的快速扩增(3’RACE) | 第67-68页 |
| ·PCR产物的克隆鉴定及DNA序列测定 | 第68-70页 |
| ·高粱CRY2与其他植物CRY2氨基酸序列的比较 | 第70-71页 |
| ·R111和har1 CRY2基因cDNA序列的比较分析 | 第71页 |
| ·R111 CRY2基因组DNA的克隆 | 第71-74页 |
| ·高粱har1 CRY2基因组DNA的克隆以及与R111的序列比较 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 高粱CRY2原核表达及抗血清的制备 | 第77-90页 |
| 1 引言 | 第77页 |
| 2 材料与方法 | 第77-84页 |
| ·材料 | 第77-80页 |
| ·细菌菌株和质粒： | 第77-78页 |
| ·CRY2基因片段PCR扩增的引物设计 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·培养基的配制 | 第78-79页 |
| ·蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液 | 第79-80页 |
| ·方法 | 第80-84页 |
| ·引物的设计与合成 | 第80页 |
| ·PCR扩增 | 第80页 |
| ·目的片段的纯化与酶切 | 第80页 |
| ·pET32(a)-CRY2表达载体的构建 | 第80页 |
| ·质粒DNA的酶切 | 第80-81页 |
| ·外源目的片段与载体的连接 | 第81页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第81页 |
| ·序列测定 | 第81页 |
| ·CRY2融合蛋白质的诱导表达以及表达形式的确定 | 第81-82页 |
| ·大肠杆菌融合蛋白的大量诱导表达及表达蛋白的初步纯化 | 第82页 |
| ·蛋白质的电转移 | 第82页 |
| ·大肠杆菌融合蛋白Western-blotting检测 | 第82-83页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第83页 |
| ·间接ELISA检测多克隆抗体的活性 | 第83-84页 |
| 3 结果与分析 | 第84-89页 |
| ·基因的获得 | 第84页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第84-85页 |
| ·测序及序列比较 | 第85-87页 |
| ·CRY2融合蛋白的表达及表达部位的SDS-PAGE凝胶的电泳检测 | 第87-88页 |
| ·CRY2融合蛋白表达的Western-blotting检测 | 第88-89页 |
| ·间接ELISA检测抗高粱CRY2抗体的活性 | 第89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 第五章 高粱野生型R111和突变体har1 CRY2的表达 | 第90-96页 |
| 1 引言 | 第90页 |
| 2.材料和方法 | 第90-92页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·PCR引物的设计 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-92页 |
| ·植物总RNA的提取及定量 | 第90-91页 |
| ·半定量RT-PCR | 第91页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第91页 |
| ·蛋白质电泳和转移 | 第91页 |
| ·Western-blotting印迹 | 第91-92页 |
| 3.结果与分析 | 第92-94页 |
| ·CRY2在野生型高粱R111不同部位的表达 | 第92-93页 |
| ·蓝光下CRY2蛋白的降解 | 第93页 |
| ·黑暗和光照条件下CRY2蛋白含量的变化 | 第93-94页 |
| 4.讨论 | 第94-96页 |
| 今后工作展望 | 第96-97页 |
| 总结 | 第97-98页 |
| 论文创新点 | 第98-100页 |
| 攻读博士学位期间发表论文与参与科研情况 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
