| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词(ABBREVIATIONS) | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 研究概况 | 第11-19页 |
| 1 根癌农杆菌介导的植物遗传转化系统 | 第11-13页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化系统的优点 | 第11-12页 |
| ·影响根癌农杆菌介导的遗传转化效率的因素 | 第12-13页 |
| 2 MAPKK基因及其在植物中的功能 | 第13-16页 |
| ·MAPKK及MAPKK基因 | 第13页 |
| ·MAPKK在植物中的功能 | 第13-15页 |
| ·植物生物胁迫中的MAPK级联途径 | 第14页 |
| ·植物非生物胁迫中的MAPK级联途径 | 第14-15页 |
| ·植物中MAPK级联组途径的其他功能 | 第15页 |
| ·MAPKK基因转基因研究进展 | 第15-16页 |
| 3 大岩桐组织培养和遗传转化研究进展 | 第16-17页 |
| ·大岩桐组织培养研究概况 | 第16-17页 |
| ·大岩桐遗传转化研究进展 | 第17页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 野生型、突变型MAPKK基因植物表达载体的构建及工程菌种的制备 | 第19-32页 |
| 1 材料与方法 | 第19-28页 |
| ·野生型、突变型MAPKK基因植物表达载体的构建 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·载体与菌株 | 第19-20页 |
| ·MAPKK基因PCR扩增引物 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-26页 |
| ·细菌的培养 | 第21页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA及其纯化 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及质粒DNA的转化 | 第22-23页 |
| ·DNA的限制性酶切 | 第23页 |
| ·DNA片段的回收 | 第23-24页 |
| ·DNA片段的连接 | 第24页 |
| ·PCR扩增反应的条件 | 第24-25页 |
| ·载体构建流程图 | 第25-26页 |
| ·工程菌种的制备 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·根癌农杆菌Mini-Ti质粒的提取 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌感受态的制备及质粒的转化 | 第27页 |
| ·转化子单菌的直接PCR鉴定及酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·野生型、突变型MAPKK基因植物表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第28页 |
| ·tMEK2、tMEK2~(MUT)克隆到pMD 18 -T载体 | 第28-29页 |
| ·中间表达载体的构建及酶切鉴定 | 第29页 |
| ·表达载体的构建及酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404转化子的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| ·野生型、突变型MAPKK基因植物表达载体的构建 | 第31页 |
| ·工程菌种的制备 | 第31-32页 |
| 第三章 大岩桐遗传转化体系的建立及转化再生植株的鉴定 | 第32-44页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| ·大岩桐遗传转化体系的建立 | 第32-35页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·植物材料的培养 | 第32-33页 |
| ·农杆菌的培养 | 第33页 |
| ·叶盘法转化 | 第33-34页 |
| ·抑菌抗生素对根癌农杆菌生长的影响 | 第34页 |
| ·抑菌抗生素对大岩桐不定芽诱导的影响 | 第34页 |
| ·选择抗生素对大岩桐不定芽诱导的影响 | 第34页 |
| ·选择抗生素对大岩桐不定根诱导的影响 | 第34页 |
| ·影响转化效率的几个因子对转化效率的影响 | 第34页 |
| ·酚类添加物对转化效率的影响 | 第34-35页 |
| ·转化再生植株的检测 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·植物DNA的抽提 | 第35页 |
| ·转化再生植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·大岩桐遗传转化体系的建立 | 第36-41页 |
| ·抑菌抗生素(头孢酶素)对根癌农杆菌生长的影响 | 第36页 |
| ·抑菌抗生素(头孢酶素)对大岩桐不定芽诱导的影响 | 第36-37页 |
| ·卡那霉素对大岩桐不定芽诱导的影响 | 第37页 |
| ·卡那霉素对大岩桐不定根诱导的影响 | 第37-40页 |
| ·AS对转化效率的影响 | 第40-41页 |
| ·转化再生植株的PCR检测 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| ·大岩桐遗传转化体系的建立 | 第41-43页 |
| ·抗生素对大岩桐不定芽诱导的影响 | 第41页 |
| ·几种影响因子对大岩桐遗传转化效率的影响 | 第41-43页 |
| ·转化外植体的褐化、污染问题 | 第43页 |
| ·转化再生植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| 小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 图版 | 第49-51页 |
| 攻读硕士学位论文期间发表的文章 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
