| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-14页 |
| 第一章 蝎毒素的研究进展 | 第14-41页 |
| ·蝎的种类及分布 | 第14-15页 |
| ·蝎毒的组成与性质 | 第15页 |
| ·蝎毒素的特征与分类 | 第15-24页 |
| ·Na~+通道毒素 | 第16-19页 |
| ·K~+通道毒素 | 第19-22页 |
| ·Cl~-通道毒素 | 第22-23页 |
| ·Ca~(2+)通道毒素 | 第23-24页 |
| ·K~+通道与K~+通道毒素 | 第24-31页 |
| ·离子通道 | 第24-26页 |
| ·K~+通道 | 第26-27页 |
| ·K~+通道毒素的结构 | 第27-29页 |
| ·K~+通道毒素与K~+通道的相互作用研究 | 第29-31页 |
| ·蝎毒素研究的意义 | 第31-41页 |
| ·蝎毒素是研究离子通道的工具 | 第31-32页 |
| ·蝎毒素与分子进化 | 第32-35页 |
| ·蝎毒素与蛋白质工程 | 第35-36页 |
| ·蝎毒素与模式基因 | 第36-37页 |
| ·蝎毒素与抗肿瘤 | 第37-38页 |
| ·抗癫痫作用 | 第38页 |
| ·蝎毒素与杀虫剂 | 第38-40页 |
| ·蝎毒素与抗菌 | 第40-41页 |
| 第二章 东亚钳蝎BmTXKβ毒素样肽cDNA的克隆及序列分析 | 第41-49页 |
| 0 引言 | 第41-42页 |
| 1 材料和方法 | 第42-44页 |
| ·PCR引物的设计 | 第42-43页 |
| ·PCR策略筛选cDNA文库 | 第43-44页 |
| ·DNA测序和计算机分析 | 第44页 |
| 2 结果和讨论 | 第44-49页 |
| 第三章 东亚钳蝎蝎毒素BmTXKβ基因组克隆及其基因组织结构分析 | 第49-66页 |
| 0 引言 | 第49-51页 |
| 1 材料和方法 | 第51-54页 |
| ·材料与试剂 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-54页 |
| ·Buthus martensii Karsch总基因组DNA的提取 | 第51页 |
| ·BmTXKβ成熟肽编码区基因组序列的克隆及其测序 | 第51-52页 |
| ·BmTXKβ全长cDNA探针的制备 | 第52-53页 |
| ·基因组Southern杂交 | 第53页 |
| ·BmTXKβ信号肽编码区和3’UTR编码区的基因组序列克隆 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-62页 |
| ·BmTXKβ成熟肽基因组DNA序列 | 第54-56页 |
| ·基因组southern杂交 | 第56-57页 |
| ·BmTXKβ信号肽编码区和3’UTR编码区的基因组克隆及序列分析 | 第57-62页 |
| 3 讨论 | 第62-66页 |
| ·BmTXKβ基因组织结构 | 第62-64页 |
| ·Vectorette方法克隆未知片段 | 第64-66页 |
| 第四章 东亚钳蝎蝎毒素BmTXKβ的表达、纯化和功能的研究 | 第66-80页 |
| 0 引言 | 第66-67页 |
| 1 材料和方法 | 第67-72页 |
| ·材料与试剂 | 第67-69页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·溶液配制 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| ·引物设计 | 第69页 |
| ·重组表达载体pGEX-BmTXKβ的构建 | 第69-71页 |
| ·重组BmTXKβ的表达和纯化 | 第71-72页 |
| ·电生理实验 | 第72页 |
| 2 结果 | 第72-77页 |
| ·重组表达载体pGEX-BmTXKβ的构建 | 第72-73页 |
| ·重组BmTXKβ的表达和纯化 | 第73-75页 |
| ·电生理实验 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-80页 |
| 第五章 东亚钳蝎短链K~+通道毒素BmP05′的cDNA与基因组克隆及其序列分析 | 第80-95页 |
| 0 引言 | 第80-82页 |
| 1 材料与方法 | 第82-86页 |
| ·材料与试剂 | 第82页 |
| ·引物设计与合成 | 第82-83页 |
| ·东亚钳蝎毒腺组织总RNA的制备 | 第83页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第83-84页 |
| ·双链cDNA合成 | 第84-85页 |
| ·3′RACE | 第85页 |
| ·5′RACE | 第85-86页 |
| ·BmP05′基因组的克隆 | 第86页 |
| ·Southern杂交 | 第86页 |
| 2 结果 | 第86-94页 |
| ·总RNA的制备和mRNA的纯化 | 第86-87页 |
| ·BmP05’基因的3′和5′RACE | 第87-88页 |
| ·BmP05’的基因组克隆及其序列分析 | 第88-91页 |
| ·BmP05’基因的mRNA多型性和基因组个体多态性 | 第91-94页 |
| 3 讨论 | 第94-95页 |
| 第六章 东亚钳蝎短链钾通道毒素BmP05′结构与功能关系的研究 | 第95-109页 |
| 0 引言 | 第95-97页 |
| 1 材料与方法 | 第97-101页 |
| ·材料与试剂 | 第97-98页 |
| ·材料 | 第97页 |
| ·生物信息学软件 | 第97-98页 |
| ·方法 | 第98-101页 |
| ·引物设计与合成 | 第98页 |
| ·BmP05′突变体的设计 | 第98-99页 |
| ·定点突变及突变体的筛选 | 第99-100页 |
| ·野生型和突变型BmP05’与GST融合蛋白的表达与纯化 | 第100页 |
| ·细胞培养及其转染 | 第100页 |
| ·野生型BmP05′和突变体M1的GST融合蛋白与SKCa通道的相互作用 | 第100-101页 |
| ·BmP05′及其突变体与钾通道相互作用的计算机模拟 | 第101页 |
| 2 结果 | 第101-107页 |
| ·PCR构建BmP05′突变体 | 第101-102页 |
| ·野生型和突变型BmPO5融合蛋白的表达和纯化 | 第102-103页 |
| ·野生型BmPO5′和突变体M1的GST融合蛋白与SKCa通道的相互作用 | 第103-105页 |
| ·BmP05′及其突变体与钾通道相互作用的计算机模拟 | 第105-107页 |
| ·BmP05′和BmP05′M1的分子模建 | 第105页 |
| ·SKCa2通道和Kv1.2通道的分子模建 | 第105-106页 |
| ·毒素与通道复合物的分子模建 | 第106-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-126页 |
| 本研究工作的创新点 | 第126-127页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
