| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 英文缩写说明 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 来源和化学结构 | 第12-14页 |
| 2 Doramectin的生物活性和作用机理 | 第14-16页 |
| ·Doramectin的生物活性 | 第14-15页 |
| ·Doramectin的作用机制 | 第15-16页 |
| 3 研究阿维菌素类生物合成的主要方法 | 第16-19页 |
| ·掺入标记前体研究生物合成前体的来源 | 第16-17页 |
| ·通过四因子杂交法建立基因连锁图 | 第17页 |
| ·分析生物合成阻断突变株特征 | 第17页 |
| ·生物合成基因的克隆 | 第17-19页 |
| 4 阿维菌素类生物合成基因簇 | 第19-20页 |
| 5 生物合成途径 | 第20页 |
| 6、应用阿维菌素类生物合成基因进行菌种改良 | 第20-24页 |
| ·选择性地产生阿维菌素B1a和B2a | 第22页 |
| ·选择性地产生阿维菌素B2a | 第22页 |
| ·去掉寡霉素(oligomycin) | 第22-23页 |
| ·选择性产生5-酮阿维菌素B1a和B2a | 第23页 |
| ·应用突变生物合成产生新的阿维菌素衍生物 | 第23-24页 |
| 7、立题依据 | 第24-25页 |
| 第二篇 实验部分 | 第25-91页 |
| 第一章 Doramectin的菌种选育 | 第25-46页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| ·菌种 | 第25页 |
| ·主要材料和试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27页 |
| 2.方法 | 第27-33页 |
| ·菌种培养和发酵 | 第27-29页 |
| ·Doramctin的HPLC检测方法 | 第29页 |
| ·斜面培养基的筛选 | 第29页 |
| ·菌种选育 | 第29-33页 |
| 3.结果和讨论 | 第33-44页 |
| ·菌种培养和发酵 | 第33-36页 |
| ·Doramectin菌种选育模型的建立 | 第36-41页 |
| ·诱变选育 | 第41-44页 |
| 4 结论 | 第44-46页 |
| 第二章 利用原生质体制备再生选育Doramectin高产菌株 | 第46-59页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| ·菌种 | 第46页 |
| ·主要材料和试剂 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-51页 |
| ·除虫链霉菌的生长曲线 | 第48页 |
| ·除虫链霉菌原生质体的制备 | 第48-49页 |
| ·链霉菌原生质体的再生 | 第49页 |
| ·除虫链霉菌原生质体的融合 | 第49-50页 |
| ·原生质体的UV诱变 | 第50页 |
| ·原生质体的~(60)Co诱变处理 | 第50-51页 |
| 3 结果与讨论 | 第51-58页 |
| ·除虫链霉菌的生长曲线 | 第51页 |
| ·除虫链霉菌原生质体制备及再生条件的考察 | 第51-55页 |
| ·原生质体融合筛选优势菌种 | 第55-57页 |
| ·原生质体UV处理的影响 | 第57-58页 |
| ·原生质体~(60)Co诱变的影响 | 第58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 第三章 Doramectin基因工程菌的构建 | 第59-91页 |
| 1、材料 | 第59-64页 |
| ·化学药品和生化试剂 | 第59-60页 |
| ·质粒 | 第60页 |
| ·菌种 | 第60-61页 |
| ·培养基 | 第61-63页 |
| ·主要试剂配制 | 第63-64页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第64页 |
| 2 方法 | 第64-74页 |
| ·大肠杆菌相关的操作 | 第64-67页 |
| ·aveD基因的PCR扩增、克隆和测序 | 第67-69页 |
| ·链霉菌相关操作 | 第69-74页 |
| 3 结果与讨论 | 第74-87页 |
| ·除虫链霉菌染色体DNA溶液的制备 | 第74-75页 |
| ·PCR方法扩增aveD基因及质粒pLY32的构建 | 第75-81页 |
| ·质粒pLY33的构建 | 第81-83页 |
| ·pLY34质粒的构建 | 第83-85页 |
| ·质粒pLY34转化除虫链霉菌HCB10042-36 | 第85-87页 |
| 4 结论 | 第87-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 附录： | 第92-93页 |
