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苹果花叶病毒(ApMV)和李属矮缩病毒(PDV)RT-PCR检测体系的研究

缩略词第1-7页
引言第7-15页
第一部分 苹果花叶病毒和李属矮缩病毒RT-PCR检测技术的建立及优化第15-27页
 1 材料与方法第15-17页
   ·试验材料第15-16页
     ·果树材料第15-16页
     ·RNA提取试剂第16页
     ·RT-PCR试剂第16页
   ·试验方法第16-17页
     ·总RNA的提取第16-17页
     ·总RNA含量、纯度及完整性的检测第17页
     ·RT第17页
     ·PCR扩增第17页
 2 结果与分析第17-27页
   ·果树组织中总RNA完整性及纯度检验第17-18页
     ·果树组织中总RNA完整性检验第17-18页
     ·果树组织中总RNA的提取纯度第18页
   ·ApMV和PDV的RT-PCR检测体系的建立及ApMV的体系优化第18-27页
     ·ApMV的 RT-PCR检测体系的建立及优化第18-26页
     ·PDV的RT-PCR检测体系的建立第26-27页
第二部分 苹果花叶病毒和李属矮缩病毒RT-PCR特异产物克隆测序研究第27-35页
 1 试验材料与方法第27-30页
   ·试验材料第27页
     ·果树材料第27页
     ·菌种与质粒第27页
     ·酶及试剂第27页
   ·试验方法第27-30页
     ·cDNA片断的回收纯化第27-28页
     ·构建重组质粒第28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
     ·重组质粒的转化与培养第28-29页
     ·重组质粒的回收与纯化第29页
     ·重组质粒的酶切鉴定以及cDNA片断的序列测定第29-30页
 2 结果与分析第30-31页
   ·特异DNA片断的克隆第30页
   ·ApMV和PDV部分CPgene cDNA片断的序列分析第30-31页
 3 讨论第31-33页
   ·关于RNA的提取第31-32页
   ·影响RT-PCR扩增的因素及反应条件第32-33页
     ·PCR循环参数的选定第32页
     ·PCR反应体系第32-33页
 4 结论第33-35页
致谢第35-36页
参考文献第36-40页
附录第40-43页
作者简介第43页

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