缩略词 | 第1-7页 |
引言 | 第7-15页 |
第一部分 苹果花叶病毒和李属矮缩病毒RT-PCR检测技术的建立及优化 | 第15-27页 |
1 材料与方法 | 第15-17页 |
·试验材料 | 第15-16页 |
·果树材料 | 第15-16页 |
·RNA提取试剂 | 第16页 |
·RT-PCR试剂 | 第16页 |
·试验方法 | 第16-17页 |
·总RNA的提取 | 第16-17页 |
·总RNA含量、纯度及完整性的检测 | 第17页 |
·RT | 第17页 |
·PCR扩增 | 第17页 |
2 结果与分析 | 第17-27页 |
·果树组织中总RNA完整性及纯度检验 | 第17-18页 |
·果树组织中总RNA完整性检验 | 第17-18页 |
·果树组织中总RNA的提取纯度 | 第18页 |
·ApMV和PDV的RT-PCR检测体系的建立及ApMV的体系优化 | 第18-27页 |
·ApMV的 RT-PCR检测体系的建立及优化 | 第18-26页 |
·PDV的RT-PCR检测体系的建立 | 第26-27页 |
第二部分 苹果花叶病毒和李属矮缩病毒RT-PCR特异产物克隆测序研究 | 第27-35页 |
1 试验材料与方法 | 第27-30页 |
·试验材料 | 第27页 |
·果树材料 | 第27页 |
·菌种与质粒 | 第27页 |
·酶及试剂 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-30页 |
·cDNA片断的回收纯化 | 第27-28页 |
·构建重组质粒 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
·重组质粒的转化与培养 | 第28-29页 |
·重组质粒的回收与纯化 | 第29页 |
·重组质粒的酶切鉴定以及cDNA片断的序列测定 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-31页 |
·特异DNA片断的克隆 | 第30页 |
·ApMV和PDV部分CPgene cDNA片断的序列分析 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
·关于RNA的提取 | 第31-32页 |
·影响RT-PCR扩增的因素及反应条件 | 第32-33页 |
·PCR循环参数的选定 | 第32页 |
·PCR反应体系 | 第32-33页 |
4 结论 | 第33-35页 |
致谢 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
附录 | 第40-43页 |
作者简介 | 第43页 |