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疏水色谱法对猪心中细胞色素C的分离纯化及液相色谱法对还原变性牛胰岛素折叠特性的研究

第一章 文献综述第1-26页
   ·生物大分子分离与纯化研究概述第12页
   ·色谱基本理论第12-15页
     ·液相色谱中溶质的计量置换保留模型第12-14页
     ·短柱理论第14页
     ·分离模式第14-15页
   ·简易型色谱柱第15-17页
   ·蛋白质的变性与复性第17-18页
     ·蛋白质的变性第17页
     ·胍、脲变性剂的变性机理第17-18页
     ·蛋白质的复性第18页
   ·蛋白质的复性机理第18-19页
   ·液相色谱法对蛋白质的复性第19-21页
   ·二硫键的正确对接第21-22页
   ·胰岛素复性研究意义第22-23页
 参考文献第23-26页
第二章 疏水色谱法从猪心中纯化分离细胞色素-C第26-46页
   ·概述第26-28页
     ·生化药物的制备第26页
     ·细胞色素-C第26-28页
   ·实验部分第28-31页
     ·仪器和设备第28页
     ·试剂与材料第28页
     ·实验方法第28-31页
       ·猪心Cyt-C的提取第28-29页
       ·柱子的装填第29页
       ·经典吸附层析法纯化细胞色素C第29-30页
       ·色谱法分离纯化细胞色素C第30页
       ·含铁量的测定第30-31页
       ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第31页
       ·蛋白含量的测定-Bradford法第31页
   ·结果与讨论第31-44页
     ·经典吸附层析法第31-32页
     ·用简易型疏水色谱柱对细胞色素C的纯化第32-36页
       ·简易型疏水色谱柱对标准蛋白的色谱分离第32页
       ·简易型疏水色谱柱对Cyt-C的分离第32-36页
     ·纯度的检验第36-39页
       ·反相色谱第36-37页
       ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第37-38页
       ·基质辅助激光解析飞行时间质谱第38-39页
     ·Cyt-C质量回收率的测定第39-40页
     ·铁含量的测定第40页
     ·紫外图谱比较第40-41页
     ·制备规模的扩大与发展前景第41-44页
       ·大柱对标准蛋白的色谱分离第41页
       ·大柱对Cyt-C的纯化分离第41-43页
       ·应用前景第43-44页
   ·结论第44-45页
 参考文献第45-46页
第三章 体积排阻色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究第46-59页
   ·复性原理第46-49页
   ·实验部分第49-50页
     ·仪器和设备第49页
     ·试剂与材料第49页
     ·还原胍变,脲变Ins的配制第49页
     ·用排阻色谱复性还原变性的Ins第49-50页
     ·反相色谱法检验复性结果第50页
     ·稀释法第50页
   ·结果与讨论第50-57页
     ·还原变性Ins在等度SEC上的色谱行为第51-53页
       ·三种流动相中还原变性Ins的折叠行为第51-53页
       ·改变流动相中脲浓度对还原变性Ins的折叠行为的影响第53页
     ·还原变性Ins在脲梯度复性中的色谱行为第53-56页
     ·用反相色谱检验复性结果第56-57页
   ·结论第57-58页
 参考文献第58-59页
第四章 疏水色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究第59-70页
   ·复性原理第59-61页
     ·蛋白分子中的疏水作用力第59-60页
     ·疏水色谱的折叠机理第60-61页
   ·实验部分第61-63页
     ·仪器和设备第61-62页
     ·试剂与材料第62页
     ·还原胍变,脲变Ins的配制第62页
     ·用疏水色谱法复性还原变性的Ins第62页
     ·反相色谱法检验复性结果第62-63页
     ·稀释法第63页
   ·结果与讨论第63-68页
     ·流动相中GSH/GSSG的比率对还原变性Ins在疏水色谱上折叠行为的影响第63页
     ·流动相中脲浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响第63-66页
     ·流动相中盐浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响第66-67页
     ·用反相色谱检验稀释法与疏水色谱法复性结果第67-68页
   ·结论第68-69页
 参考文献第69-70页
第五章 离子交换色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究第70-83页
   ·复性原理第70-71页
   ·实验部分第71-72页
     ·仪器和设备第71页
     ·试剂与材料第71-72页
     ·还原胍变,脲变Ins的配制第72页
     ·用离子交换色谱法复性还原变性的Ins第72页
     ·稀释法第72页
     ·紫外吸收光谱(UV)和荧光光谱(FR)第72页
   ·结果与讨论第72-81页
     ·进样量的选择第72-74页
     ·流动相组成对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响第74-76页
       ·流动相A液的影响第74页
       ·洗脱剂的影响第74-75页
       ·流动相中添加GSH/GSSG对还原变性胰岛素色谱行为的影响第75-76页
       ·流动相中添加脲对还原变性胰岛素色谱行为的影响第76页
     ·pH值对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响第76-78页
     ·复性效果检验第78-80页
       ·紫外吸收光谱第78-79页
       ·荧光扫描第79-80页
     ·稀释法与色谱法比较第80-81页
   ·结论第81-82页
 参考文献第82-83页

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