| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一章 噬菌体抗体库技术研究进展 | 第12-24页 |
| ·噬菌体抗体库技术的基本原理 | 第12-14页 |
| ·噬菌体抗体库技术的原理 | 第12-14页 |
| ·噬菌体抗体库的种类 | 第14页 |
| ·噬菌体抗体库的构建 | 第14-18页 |
| ·免疫球蛋白基因扩增 | 第14-16页 |
| ·噬菌体抗体库载体 | 第16-17页 |
| ·电转化技术 | 第17-18页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第18-21页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选方法 | 第18-19页 |
| ·提高筛选出的抗体的亲和力 | 第19-21页 |
| ·噬菌体抗体库技术的应用 | 第21-24页 |
| ·医学微生物研究 | 第21-22页 |
| ·自身免疫疾病的研究 | 第22页 |
| ·在肿瘤研究中的应用 | 第22页 |
| ·诊断和治疗方面 | 第22-23页 |
| ·其他方面 | 第23-24页 |
| 第二章 单克隆抗体人源化研究进展 | 第24-28页 |
| ·鼠McAb人源化的原则和策略 | 第24页 |
| ·鼠McAb人源化方法 | 第24-28页 |
| ·嵌合抗体 | 第24-25页 |
| ·改型抗体 | 第25-26页 |
| ·通过抗体库技术进行鼠单抗人源化 | 第26-28页 |
| 试验研究 | 第28-68页 |
| 第三章 整合素ανβ3单抗E10可变区基因的克隆及序列分析 | 第28-36页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·细胞 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·主要工具酶、试剂 | 第28页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第28-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·杂交瘤E10细胞总RNA的提取 | 第30页 |
| ·反转录cDNA | 第30页 |
| ·mAb E10可变区基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·mAb E10可变区基因的鉴定 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·mAb VH和VL基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·mAb VH和VL基因的克隆 | 第32页 |
| ·pGEM-T-VH/VL质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·mAb VH和VL基因的序列测定和分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第四章 抗人整合素ανβ3单抗E10鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的构建和表达 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·质粒、宿主菌和噬菌体 | 第36页 |
| ·蛋白、酶和试剂 | 第36页 |
| ·主要溶液 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增鼠VH、VL及人恒定区CH1、CK基因 | 第38页 |
| ·鼠/人嵌合FD基因的连接与克隆 | 第38页 |
| ·鼠/人嵌合Fab表达载体的构建 | 第38页 |
| ·鼠/人嵌合Fab的表达 | 第38页 |
| ·鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·PCR扩增E10 VH、VL及人恒定区CH1、CK基因 | 第39页 |
| ·鼠/人嵌合FD和轻链基因的连接 | 第39-40页 |
| ·鼠/人嵌合Fab表达载体的构建及酶切鉴定 | 第40页 |
| ·鼠/人嵌合Fab抗体的鉴定 | 第40-42页 |
| ·讨 论 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第五章 预设CDR3噬菌体抗体库导向筛选抗人整合素ανβ3单抗E10人源化Fab | 第43-68页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·抗体、细胞 | 第43-44页 |
| ·工具酶、主要生化试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-52页 |
| ·大肠杆菌电转化感受态细胞的制备及效率的测定 | 第44页 |
| ·辅助病毒VCSM13的制备、滴度测定 | 第44-45页 |
| ·质粒的小量提取及大量制备 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45-47页 |
| ·构建含鼠单抗CDR3的人轻链和FD基因库 | 第47-48页 |
| ·鼠嵌合重链FD-人轻链杂合噬菌体抗体库的构建 | 第48-49页 |
| ·鼠嵌合重链FD-人轻链杂合噬菌体抗体库的特异性富集 | 第49页 |
| ·特异性单克隆杂合噬菌体抗体的制备 | 第49-50页 |
| ·杂合噬菌体抗体的鉴定 | 第50页 |
| ·人源噬菌体抗体库的构建 | 第50-51页 |
| ·人源噬菌体抗体库的特异性富集 | 第51页 |
| ·人源特异性单克隆噬菌体抗体的制备 | 第51页 |
| ·人源噬菌体抗体的鉴定 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-66页 |
| ·构建含鼠单抗CDR3的人轻链和FD基因 | 第52-54页 |
| ·杂合噬菌体抗体库的构建与鉴定 | 第54-55页 |
| ·杂合抗体库的筛选 | 第55-56页 |
| ·杂合噬菌体抗体的鉴定 | 第56-58页 |
| ·杂合噬菌体抗体轻链基因的测定和序列分析 | 第58-60页 |
| ·人源噬菌体抗体库的构建及人源抗体Fab的筛选 | 第60-61页 |
| ·人源噬菌体抗体的鉴定 | 第61-63页 |
| ·人源噬菌体抗体重链Fd基因的测定和序列分析 | 第63-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 结 论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 附录 (缩略语) | 第76-78页 |
| 致 谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
